酸性紅26是一種人工合成的水溶性偶氮工業染色劑，主要用于皮革的染色，對人體有很強的致癌性[1]。這種染料因具有成本低、染色性能好、顏色穩定等優點而廣泛應用于染色行業。污水綜合排放標準GB8978–1996對印染企業廢水的主要控制指標是pH值、色度、BOD、COD和氨氮含量，對染料的排放濃度沒有給出明確的限值，而染料已成為污染源之一，環境監控的常規指標不足以全面反映染料污染物的達標狀況，因此建立廢水中致癌染料的檢測方法很有必要。目前主要用反相高效液相色譜法(HPLC)檢測酸性紅26[2–3]，但由于酸性紅26*性很強，在常規C18柱中幾乎沒有保留，分析過程中常需要使用離子對試劑[1]。使用親水性色譜柱，酸性紅26的保留時間約為1min[4–5]。酸性紅26分子結構中含有多個磺酸基團，具有明顯的陰離子特點[6]。筆者嘗試采用離子色譜法分離酸性紅26，與常規反相液相色譜法相比，酸性紅26在離子交換色譜柱上具有很強的保留;在淋洗液中添加乙腈以增強洗脫能力，可減少因酸性紅26結構中含有苯環而造成的拖尾[7–8]。實驗測定了印染廢水樣品和加標樣品中酸性紅26的含量，在進樣量為25μL時，酸性紅26的定量限可達100μg/L，紫外檢測可避免印染廢水中大量陰離子的干擾[9]。

　　1實驗部分

　　1.1主要儀器與試劑

　　、

　　1.3色譜條件

　　淋洗液：100mmol/L高氯酸鈉–乙腈(體積比為1∶1);流速：1.0mL/min;分析柱：DionexIonPacAS16型，規格為250mm×4mm(美國ThermoFisher公司);保護柱：IonPacAG16型，規格為50mm×4mm(美國ThermoFisher公司);檢測器：紫外–可見檢測器;檢測波長：540nm;抑制模式：ASRS300(4mm)循環再生電抑制模式;進樣體積：25μL。

　　2結果與討論

　　2.1流動相的優化

　　酸性紅26結構中含有多個磺酸基團，可以采用高效陰離子交換色譜法對其進行分離。為了保證色譜峰形對稱及合理的洗脫時間，選擇烷醇季銨基親水性色譜柱IonPacAS16。保護柱IonPacAG16與IonPacAS16分析柱的填料相同，但長度較短，適合流動相成分的初步探索。流動相組成對IonPacAG16柱分離酸性紅26效果的影響見圖1。用離子色譜方法分析陰離子物質往往使用堿(如KOH)的水溶液作為流動相。在圖1(b)中可以看出，用40mmol/LKOH溶液作為流動相時，被測物質有嚴重的峰展寬現象。這是因為IonPacAG16色譜柱的固定相以苯乙烯基微球為基體，鍵合了季銨基離子交換基團。而酸性紅26的結構中有苯環結構，這種類似結構決定了酸性紅26與色譜柱填料

　　具有較強的相溶特性，因而在色譜柱中具有較強的保留，可能造成色譜峰的拖尾和展寬[10]。在流動相中加入40%乙腈后，待測物質的色譜峰形得到明顯改善[圖1(a)]。隨著乙腈含量的增大，酸性紅26的色譜保留時間縮短了。離子色譜法中常用的檢測器包括電導檢測器、紫外檢測器和電化學檢測器，其中，電導檢測器和紫外檢測器具有操作方便、維護簡單、穩定性好等優點。酸性紅26雖然具有多個磺酸基團，但其在電導檢測器中的響應值并不高。為了提高方法靈敏度，采用紫外/可見檢測器在波長540nm處檢測酸性紅26。這類檢測器的流通池為石英材料，不允許強堿性的流動相流過[11]。因此在使用乙腈–KOH溶液作為流動相時，必須在檢測器之前連接一個抑制器，將流動相轉化為中性溶液，結果見圖2。

　　從圖2(a)中可以看出，經過自再生電化學抑制器后，酸性紅26在紫外檢測器中顯示出一個尖銳的色譜峰。但是，這個分離條件中流動相含有大量的有機溶劑乙腈。雖然自再生電化學抑制器允許流動相中含有乙腈，但抑制器中的離子交換膜在有機溶劑的浸泡下會加速老化，縮短壽命。為了能夠開發出一個持久穩定、適合大量樣品的染料監控分析方法，將流動相調整為乙腈–0.2mol/LNaClO4溶液(體積比為4∶6)。這種混合溶液是中性的，不需要在系統中使用抑制器。另外這**動相在540nm處具有較低的紫外吸收背景，有助于提高分析靈敏度。對比圖2(a)和圖2(b)可以看出，使用NaClO4溶液時酸性紅26的色譜峰出現峰展寬現象，而且峰面積有所減小。提高乙腈在流動相中的比例，使用乙腈–0.2mol/LNaClO4溶液(體積比為1∶1)作為流動相，結果如圖2(c)所示。對比圖2(b)和圖2(c)可以看出，乙腈比例的提高有助于改善待測物質的色譜峰形[12]，但會使色譜保留時間大大縮短。如果進一步將流動相中乙腈比例提高，則不利于樣品的分離，因此將流動相確定為乙腈–0.2mol/LNaClO4溶液(體積比為1∶1)。

　　2.2重現性、線性和靈敏度

　　吸取質量濃度為10mg/L的酸性紅26標準溶液，重復進樣10次，記錄色譜圖，對酸性紅26的色譜保留時間、峰面積和峰高數據進行統計分析，結果見表1。由表1可知，酸性紅26保留時間、峰面積和峰高測定結果的相對標準偏差分別為0.10%，0.50%，0.15%，表明本方法重現性較好。

　　將酸性紅26標準品定量稀釋制得系列濃度的標準溶液，分別測定3次后，取色譜峰面積平均值，以峰面積為縱坐標、酸性紅26標準溶液質量濃度為橫坐標建立標準工作曲線，酸性紅26的線性范圍為0.1～20mg/L，相關系數為0.9999，線性方程為Y=0.4722X+0.019。以信噪比(S/N)為3計算檢出限，酸性紅26的檢出限為0.03mg/L。

　　2.3樣品分析及加標回收試驗

　　取印染廢水樣品，經過0.22μm濾膜過濾后，按1.3色譜條件進行測定，用外標法定量，樣品及樣品加標色譜圖如圖3所示，加標回收試驗結果見表2。由表2可知，酸性紅26的加標回收率為98.4%～101%，表明該方法準確度較高，可用于監測廢水中的酸性紅26。

　　3結語

　　離子色譜法測印染廢水中的酸性紅26，方法簡便、穩定，線性范圍內相關性好，準確度高，受其它因素干擾小，靈敏度高，與其它分析方法相比具有明顯優勢。