甲卡西酮是一種合成的新型毒品[1–4]，近年來在我國的濫用日益猖獗。如何對繳獲樣品中的甲卡西酮進行定性定量分析，直接關系到對犯罪分子的定罪量刑，因而成為實戰中迫切需要解決的問題。有關甲卡西酮的分析方法有液相色譜法[1]、氣質聯用法[5–6]等，但關于甲卡西酮液質聯用方面的分析方法未見報道。出于實際辦案的需要，筆者建立了甲卡西酮的LC–MS/MS定性定量分析方法。該方法與已報道的方法相比具有靈敏度高、分析時間短、流動相消耗少、線性范圍良好等優點。

　　1實驗部分

　　1.1主要儀器與試劑

　　三重串聯四*桿液質聯用儀(LC/QQQ)：Agilent6460型，由Agilent1290系統和6460三重四級桿質譜系統組成，美國安捷倫公司;乙腈：色譜純，美國Fishier試劑公司;甲酸：色譜純，瑞士Fluka公司;甲卡西酮標準品：1mg/mL，作為標準儲備溶液，美國Cerillent公司。

　　1.2色譜條件

　　色譜柱：AgilentZorbax?EclipsePlusC18色譜柱(100mm×2.1mm，1.8μm);流動相A為0.1%甲酸溶液，B為乙腈，流速為0.3mL/min，梯度洗脫程序見表1;進樣量：3μL。

　　1.3質譜條件

　　使用ESI離子源，正離子轟擊模式;霧化氣壓力：172.4kPa(25psi);干燥氣流速：10L/min;干燥氣溫度：350℃，ΔEMV為400V;母離子、子

　　離子、碰撞電壓、碰撞能量見表2。甲卡西酮標樣的MRM圖譜及提取質譜圖如圖1所示。

　　1.4定性定量方法

　　LC–MS/MS定性準則參照國際興奮劑檢測標準WADATD2003IDCR文件[7]制訂：(1)目標物與標準對照品保留時間誤差在±2%之內或±0.4min之內;(2)目標物的兩個母離子–子離子對峰面積的比率與標準對照品的兩個母離子–子離子對峰面積的比率相對誤差在±15%之內。定性認定的前提是目標與標準對照品的濃度相匹配，如果濃度過高出現超載，則應稀釋后重新進樣。LC–MS/MS定量采用外標標準曲線法，采集模式選擇多反應監測(MRM模式)。多反應監測可以進行兩次離子選擇，即通過MS1選擇一定質量的母離子，與氣體碰撞斷裂后，再經過MS2選擇一定質量的子離子，這樣大大提高了分析的專一性和靈敏度。

　　2結果與討論

　　2.1液相色譜條件選擇

　　由于分析物是堿性化合物，因而選用正離子模式，流動相選用酸性物質，分析中使用0.1%的甲酸。比較甲醇和乙腈作為有機相，結果表明，乙腈的洗脫能力較強，峰形較好，因而選擇乙腈。使用梯度洗脫是為了保證有較好的保留時間和峰形。

　　2.2質譜條件選擇

　　通過SCAN模式掃描，確定[M+H]+為164.2。

　　2.2.1通過選擇離子監測，優化毛細管出口電壓碰撞誘導解離是指通過與性分子碰撞將能量傳遞給離子的過程。Fragmentor電壓是毛細管出口的電壓，決定母離子能否飛到四級桿，保證母離子的傳輸效率，因此是需要優化的重要參數之一。

　　在SIM模式下，選擇了80，100，120，140四個碰撞電壓，得到四個響應強度。響應強度*強的是80，繼續優化，即選擇75，80，85，90四個碰撞電壓，

　　*終選擇響應*強的85作為*終優化結果。

　　2.2.2通過子離子掃描，選擇子離子，同時優化碰撞能量(CE)

　　通過**組四級桿做SIM，只允許164.2的離子通過，第二組四級桿做SCAN，得到響應*強的兩個子離子，分別為131.1和77.2。同時優化這兩個子離子的CE值，選擇10，20，30，40四個CE值，*終131.1的子離子CE值為20，77.2的子離子CE值為50。

　　2.2.3霧化氣壓力的優化

　　由于柱流速是0.3mL/min，霧化氣的參考壓力為138～207kPa(20～30psi)，因此霧化氣壓力選擇138，172，208kPa(20，25，30psi)分別優化，考查峰面積的響應值，*終選擇的霧化氣壓力為172kPa(25psi)。

　　2.2.4干燥氣流速的優化

　　干燥氣的參考流速是8～10L/min，因此選擇8，9，10L/min分別優化，考察峰面積的響應值，*終選擇的干燥氣流速為10L/min。2.2.5干燥氣溫度的優化干燥氣的參考溫度是300～350℃，因此選擇300，310，320，330，340，350℃6個溫度點進行優化，考察峰面積的響應值，*終選擇的干燥氣溫度為

　　350℃。

　　2.3標準曲線

　　利用卡西酮標準儲備溶液依次稀釋成質量濃度分別為25000，10000，5000，2500，1000，500，250，100，10，1，0.1ng/mL的系列標準液。分別取不同濃度的標準液3μL進樣，選擇響應*強的transition(164.2→131.1)記錄峰面積。每個濃度進樣3次，并對3次峰面積的平均值A及質量濃度c(mg/mL)進行線性回歸，得甲卡西酮的回歸方程：A=952.98c+41194，r2=0.9998，線性范圍為0.1～10000ng/mL，檢出限為0.04ng/mL(S/N≥3)。

　　2.4精密度試驗

　　取濃度為500ng/mL的甲卡西酮標準溶液，連續進樣10針，樣本的保留時間分別為2.224，2.212，2.201，2.205，2.212，2.206，2.205，2.2，2.195，2.219min，峰面積分別為18966，21784，21519，21663，21802，21765，22108，22415，27816，計算樣本的日內相對標準偏差;連續檢測6天，樣本的保留時間分別為2.227，2.205，2.211，2.205，2.212，2.226min，峰面積分別為21802，21663，21519，21732，21784，18966，計算樣本的日間相對標準偏差，結果見表4。

　　2.5準確度試驗

　　采用加標回收方法，稱取已知甲卡西酮含量的樣品3份，分別加入低、中、高3個濃度的標準溶液，按上述方法測定，結果見表5。由表5可知，甲卡西

　　酮回收率為95.6%～100.7%，說明方法的準確度較高

　　2.6樣品測定

　　應用此方法對某市公安局送檢的一樣品進行分析，通過與甲卡西酮標準品進行比對，保留時間一致，2個母離子–子離子對的峰面積比例與標準品接近，定性確定其為甲卡西酮。使用外標標準曲線法定量計算濃度，*終確定甲卡西酮的含量為25.4%。該檢測結果為對犯罪分子定罪量刑提供了依據。

　　3結語

　　建立了甲卡西酮的LC–MS/MS定性定量分析方法，超高效液相色譜的快速分析和質譜的MRM檢測模式以及高分辨率，使該方法所得到的數據準確可靠，分析時間僅為7min。與傳統液相色譜相比，該法大大縮短了分析時間并且提高了分析靈敏度，為樣品快速分析提供了可靠的分析平臺。