維生素C用于治療壞血病，又稱“抗壞血酸”。它能增強(qiáng)人體對疾病的抵抗力，增強(qiáng)人體對非血紅素鐵的吸收，在防治缺鐵性貧血中發(fā)揮著重要作用［1］。目前維生素C含量的測定方法有熒光法、光度分析法、碘量法、電化學(xué)分析法和酶法等［2–6］，這些方法都需要配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，試劑消耗量大。

漫反射傅里葉變換紅外光譜法（DRIFTS）是新近發(fā)展起來的一種紅外光譜技術(shù)，主要用于粉末樣品的測試［7］。它不需對樣品進(jìn)行特別處理，操作簡單，而且具有很高的靈敏度，結(jié)果可靠，已應(yīng)用于定量分析、原位測試、催化劑和動力學(xué)等研究。程存歸等［8–15］采用DRIFTS方法完成了一些藥物中有效成分含量的測定，并測定了維生素C片劑中抗壞血酸的含量［16］。杜德國等［17］應(yīng)用近紅外漫反射光譜技術(shù)定量分析了蘆丁和維生素C。HongYang等［18］分別應(yīng)用近紅外（FT–NIR）、衰減全反射（FTIR–ATR）、漫反射（DRIFT）、紅外光聲（FTIR–PAS）、拉曼光譜（FTRaman）等技術(shù)測定了食品和藥品中維生素C的含量。

筆者采用DRIFTS法，利用島津公司的IRSolution定量分析軟件處理數(shù)據(jù)，全面優(yōu)化實驗條件，測定了3種維生素C片劑中的抗壞血酸，與碘量法比較，結(jié)果滿意；同時對一種維生素C丸劑和不同顏色維生素C片劑中的抗壞血酸測定進(jìn)行了研究。

1實驗部分

1．1主要儀器與試劑

傅里葉變換紅外光譜儀：IR–Prestige-21型，帶DRS–8000漫反射附件、計算機(jī)軟件IRsolution，日本島津公司；1#樣品：關(guān)藥師維生素C片，標(biāo)示含量為50mg，山西亨瑞達(dá)制藥有限公司；

2#樣品：德維喜維生素C咀嚼片，標(biāo)示含量為200mg，東北制藥總廠；3#樣品：白云山維生素C咀嚼片，標(biāo)示含量為100mg，廣州白云山光華制藥有限公司；4#樣品：維生素C丸，標(biāo)示含量為100mg，東北制藥集團(tuán)沈陽**制藥有限公司；抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)品：分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；溴化鉀：光譜純，PIKETechnologies公司。

1．2儀器工作參數(shù)

掃描波長范圍：400～4000cm–1；鏡面為實驗背景；分辨率：8cm–1；掃描次數(shù)：20次。

1．3實驗方法

研磨KBr顆粒，并過篩（孔徑75μm），以此KBr作為稀釋劑，準(zhǔn)確稱量并配制抗壞血酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為1.099%，2.065%，3.988%，6.097%，7.021%，9.045%，12.15%，14.07%的8組標(biāo)準(zhǔn)樣品。將標(biāo)準(zhǔn)樣品均勻鋪置于樣品杯中，樣品杯內(nèi)徑為4mm，深2mm，將表面刮平，平行測定6次，保存。利用IR–Solution軟件進(jìn)行定量分析處理。研磨待測樣品，用KBr稀釋，均勻混合，同上操作。

2結(jié)果與討論

2．1抗壞血酸的透射和漫反射紅外光譜圖

抗壞血酸的透射和漫反射紅外光譜圖如圖1所示。由圖1可以看出，抗壞血酸漫反射和透射紅外光譜圖的吸收峰基本相同，3400～3230cm^–1為醇羥基R—OH的OH伸縮振動特征吸收峰，2890cm^–1左右為烷烴C—H伸縮振動特征吸收峰，1780～1680cm^–1酯羰基C=O伸縮振動特征吸收峰。

2．2分析峰的選擇

市售維生素C片中的藥用輔料有蔗糖、乳糖、酒石酸、淀粉、甜菊素、日落黃、檸檬黃、硬脂酸鎂等，其中輔料主要成分是淀粉。圖2是淀粉和抗壞血酸的漫反射紅外光譜，由圖2可知，抗壞血酸羰基的吸收與淀粉的吸收不同，淀粉不會對抗壞血酸測定產(chǎn)生干擾。分析峰的選擇對漫反射定量分析結(jié)果起著重要的作用。抗壞血酸羰基特征吸收峰較強(qiáng)，應(yīng)用IRsolution定量分析軟件分析處理，選擇吸收峰范圍為1660～1680cm–1，確定測量類型為峰面積。在此條件下定量分析，標(biāo)準(zhǔn)工作曲線線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.9783，樣品定量分析結(jié)果準(zhǔn)確。

2．3背景選擇

實驗中分別采用KBr粉末和鏡面作為背景，掃描同一個樣品，所得譜圖見圖3。由圖3可以看出，在不同背景下掃描得到的抗壞血酸樣品譜圖相同，所以KBr粉末和鏡面都可以作為背景。本實驗選擇鏡面作為背景掃描，這樣可以保證每次掃描使用的背景相同，重現(xiàn)性好。

2．4樣品杯選擇

分別用兩個不同大小的樣品杯測定同一標(biāo)準(zhǔn)樣品，兩個樣品杯深度均為2mm，直徑分別為4mm和2mm。掃描譜圖顯示，用直徑為4mm的樣品杯掃描得到吸收峰的吸光度更高，可提高分析測定的靈敏度，所以選用大樣品杯進(jìn)行測定。

2．5樣品顆粒大小的選擇

樣品的顆粒越大，越容易產(chǎn)生鏡面反射，漫反射樣品的粒度應(yīng)在2～5μm之間，粒度越小，鏡面反射成分越少，漫反射成分越高，測定的靈敏度越高。分別用孔徑75μm篩過篩后的KBr和沒過篩的KBr作為稀釋劑測定抗壞血酸的紅外光譜，圖譜見圖4。由圖4可知，過篩之后的譜圖與樣品透射光譜圖一致，而每個基團(tuán)吸收峰更強(qiáng)。所以KBr需要進(jìn)行過篩處理，所得顆粒粒徑不超過75μm。

2．6樣品分析結(jié)果

應(yīng)用DRIFTS法和碘量法分別測定4種樣品中的抗壞血酸，其中3種片劑樣品的測定結(jié)果見表1。

由表1可知，DRIFTS法與碘量法相比，精密度略低。主要原因是漫反射測定時，測定結(jié)果受樣品混勻程度、裝樣條件的限制。1#和2#樣品分別為白色、淡黃色的片劑，DRIFTS法、碘量法測定結(jié)果與標(biāo)示量基本一致。但3#樣品的測定結(jié)果與碘量法及標(biāo)示量有差異。主要原因是3#樣品有3種顏色，3種不同顏色的藥片紅外分析測定結(jié)果有差異。分別對紅色、黃色、綠色3種不同顏色的藥片用DRIFTS法測定，測定結(jié)果分別為5.88%，6.72%，8.68%。測定結(jié)果較為分散，原因可能是，漫反射紅外光譜是對照射到樣品表面的反射光進(jìn)行分析的，顏色較深的樣品對光有吸收，導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。

另外，4#樣品丸劑的DRIFTS法定量分析結(jié)果與標(biāo)示量相差很大，主要原因是維生素C丸表面附著一層堅硬的糖衣，研磨時很難與KBr混合均勻，無法得到其與KBr均勻混合的試樣，測量結(jié)果無法反映樣品中抗壞血酸的真實含量。

由測定結(jié)果可知：DRIFTS法的精密度不如碘量法。白色或淺色的片劑樣品，其DRIFTS法的定量分析結(jié)果與碘量法接近，深色或丸劑樣品測定結(jié)果不理想。

2．7加標(biāo)回收試驗

稱取KBr0.18g和1#樣品0.0150g進(jìn)行光譜分析，然后再加入0.0100g抗壞血酸進(jìn)行掃描，測定加標(biāo)回收率，平行測定3次，測定結(jié)果見表2。由表2可知，平均加標(biāo)回收率為94.0%，表明本法測量準(zhǔn)確度較高。

3結(jié)語

DRIFTS法定量分析維生素片劑中的抗壞血酸測定結(jié)果準(zhǔn)確，與碘量法測定結(jié)果基本一致。DRIFTS定量分析法無須對樣品進(jìn)行前處理，樣品制備簡單，分析速度快，不需要配制溶液，無任何試劑和溶液的消耗，可實現(xiàn)非破壞和非污染的綠色分析，費(fèi)用低，應(yīng)用范圍廣。但其測定結(jié)果的精密度不如碘量法，而且其測定結(jié)果的準(zhǔn)確程度受樣品性狀限制，白色的粉末或可研磨為粉末的樣品分析結(jié)果較為準(zhǔn)確。