西酞普蘭為選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑，臨床用于抑郁癥的治療。其分子式中存在一個手性中心，經藥理學研究表明，S-構型體的抗抑郁作用比R-構型體的至少強100倍。2006年草酸艾司西酞普蘭（分子式為C20H21FN2O·C2H2O4）在國內上市。目前國內一直沒有公認的草酸艾司西酞普蘭對照品供應，在進行含量研究時需從國外購買法定對照品，價格較高。

自20世紀60年代起，差示掃描量熱法（DSC）已被用于藥品的定性和純度的測定，20世紀80年代逐漸發展成熟，并在藥品檢測中得到廣泛應用。目前美國藥典已經把DSC法作為測定藥物純度的方法之一。采用DSC法對草酸艾司西酞普蘭的純度進行了測定，同時用非水滴定法對測定結果的準確性進行驗證。采用DSC法測定草酸艾司西酞普蘭純度無需對照品，操作簡便，結果準確。

1實驗部分

1．1主要儀器與試劑

差示掃描量熱儀：DSC–1型，瑞士MettlerToledo公司；熱

重分析儀：TGA／DSC-1型，瑞士MettlerToledo公司；

電位滴定儀：Titrino Plus 848型，瑞士Metrohm公司；

冰乙酸：分析純，北京化工廠；

高氯酸：分析純，國藥集團化學試劑有限公司；

草酸艾司西酞普蘭：中國醫學科學院藥物研究所。

1．2實驗方法

1.2.1差示掃描量熱法

精密稱取草酸艾司西酞普蘭樣品2.0～3.2 g，置于40 μL標準Al2O3 坩堝中，壓蓋，放入差示掃描量熱儀中，以40 μL標準Al2O3空坩堝為參比，進行分析，記錄DSC曲線。采用Mettler Toledo公司的分析軟件計算草酸艾司西酞普蘭樣品純度。

1.2.2非水滴定法

稱取草酸艾司西酞普蘭樣品約0.1 g，精密稱定，置于滴定池中，用冰乙酸20 mL溶解。按照電位滴定法，用HClO4滴定液（0.1 mol／L）滴定，并將滴定結果用空白試驗校正。以終點時滴定液體積計算含量，每1 mL HClO4滴定液（0.1 mol／L）相當于41.443 mg 草酸艾司西酞普蘭。

2純度計算公式

實驗使用的分析軟件(Stare software)來源于Mettler Toledo公司，該軟件以Van’t Hoff熔點下降理論為依據，見公式(1)。

由于草酸艾司酞普蘭樣品中可能含有微量雜質，其主成分的熔點會隨雜質含量的提高逐漸降低，可通過修正后的Van’t Hoff方程表示，見式(2)

由式(2)可知，TS與1／F呈線性關系，其函數關系圖稱為1／F圖（或Van’t Hoff圖），縱坐標截距即為T0，根據式(2)可計算得雜質含量X，從而得到草酸艾司酞普蘭純度結果。

3結果與討論

3.1實驗條件優化
分別對溶劑殘留、升溫速率與稱樣量3個影響因素進行研究，為草酸艾司西酞普蘭純度測定選擇*佳檢測條件。

3.1.1 溶劑殘留檢測

若草酸艾司西酞普蘭樣品中含有殘留溶劑，對其進行差示掃描量熱檢測時，殘留溶劑會在升溫過程中吸熱，產生吸熱峰，嚴重影響草酸艾司西酞普蘭純度測定結果的準確性。選擇升溫范圍為40～180℃，草酸艾司西酞普蘭供試樣品DSC檢測曲線見圖1。由圖1可知，除在151℃有明顯的草酸艾司西酞普蘭熱吸收峰外無其它吸熱峰出現。
熱重分析法(TG)可準確測量樣品在溫度變化過程中的質量變化及變化速率。以70 μL標準空坩堝為參比，取樣品適量，放入熱重分析儀中，記錄熱失重曲線，見圖2。從圖2中可以看出，樣品從40～151℃的升溫過程中無質量變化，基線平直。表明草酸艾司西酞普蘭樣品中無其它殘留溶劑存在。

3.1.2升溫速率

程序升溫速率對DSC曲線的峰溫和峰形均產生顯著影響，當升溫速率增加時，峰溫隨之升高，峰形變大且更加尖銳。升溫速率高會導致樣品內部溫度分布不均勻，溫度梯度增大，吸收峰變寬，使測定結果準確度下降；升溫速率低，爐體和樣品接近熱平衡狀態，有利于提高測定結果的準確性，但過低的升溫速率會增加實驗耗時、儀器負擔、產生不光滑DSC檢測曲線。

3.1.3稱樣量

樣品稱樣量對結果的準確性和靈敏度有一定影響。稱樣量較少時，可以提高檢測靈敏度，消除因升溫產生的溫度梯度，但稱樣誤差較大；稱樣量較大時，樣品內部傳熱慢、溫度梯度大，導致峰形擴大，分辨力下降。

3.1.4條件優化試驗

進行不同水平條件組合下的雙因素無重復試驗，對結果進行方差分析，選擇*佳檢測條件。試驗設計內容：10個水平條件的升溫速率（1，2，3，4，5，6，7，8，9，10 K／min），3個水平條件的樣品質量（2.0~2.2，2.5～2.7，3.0～3.2 mg）。試驗結果見表1，方差分析結果見表2、表3。實驗結果表明，稱樣量對草酸艾司西酞普蘭純度測定結果無顯著影響(P-value=0.70>0.05)，而升溫速率對其純度測定有顯著影響（P-value=0.047<0.05），見表2。調整升溫速率范圍為2～5 K／min，在此范圍內升溫速率對測定結果無顯著影響（P-value=0.18>0.05），見表3。綜合分析后*終確定升溫速率為4 K／min、稱樣量為2.0～3.2 mg。

3．2熾灼殘渣的影響

若草酸艾司西酞普蘭樣品中含有非揮發性無機雜質，則影響測定結果準確性。按照熾灼殘渣法（中國藥典2010版附錄VIIIN），測得殘渣量為0.05%。

3．3方法學線性和精密度考察

分別精密稱取6份不同質量（2.0～3.2 mg）的草酸艾司西酞普蘭樣品，利用差示掃描量熱儀對其純度進行測定，升溫速率為4 K／min，記錄DSC曲線，見圖3。草酸艾司西酞普蘭純度測定結果的平均值為99.23%，相對標準偏差為0.05%，實驗結果如見表4。因樣品檢查熾灼殘渣結果為0.05%，所以DSC測定結果應校正為99.17%。以草酸艾司西酞普蘭的稱樣量為橫坐標(x)，測得的吸熱峰面積為縱坐標(y)，繪制標準曲線, 得曲線方程為y=84.613x+26.289，相關系數r＝0.999 9，見圖4。綜合上述分析可知，測定草酸艾司西酞普蘭純度的DSC法具有良好的線性和精密度。

3．4非水滴定法測定結果

非水滴定法是在水以外的溶劑中進行滴定的方法。非水溶劑可增大樣品的溶解度，增強其酸堿度，擴大酸堿滴定范圍，得到明顯的終點突躍。此法具有靈敏準確、選擇性高等優點，可準確測定草酸艾司西酞普蘭純度，因此用該法驗證差示掃描量熱法測定結果的準確性。

采用非水滴定法分別對6份草酸艾司西酞普蘭樣品進行純度檢測，檢測結果分別為99.15%，99.18%，99.22%，99.27%，99.29%，99.31%，平均值為99.24%，相對標準偏差為0.06%。由此可見，差示掃描量熱法與非水滴定法對草酸艾司西酞普蘭純度測定結果基本一致。

4結論

(1)差示掃描量熱法可在程序升溫的條件下測量樣品與參比物之間的熱量差隨溫度的變化情況。在進行物質純度檢測的過程中，DSC可對供試樣品產生的熱效應給予及時補償，使供試樣品與參比物之間無溫差、無熱交換，供試樣品的升溫速率始終跟隨爐溫進行線性升溫，使檢測方法有較高的靈敏度和精確度。

(2)采用差示掃描量熱法測定草酸艾司西酞普蘭純度具有試樣用量少，操作簡單，無污染，靈敏度、精密度高等優點。該方法可準確檢測純度在98%以上的樣品，在檢測過程中無需使用對照品。經非水滴定法驗證，差示掃描量熱法測定草酸艾司西酞普蘭純度是可行性的，為草酸艾司西酞普蘭純度測定提供了一種新的檢測方法。

摘自化學分析計量網