作者:宋檢 時間:2022-10-21 來源:互聯網
現有的測定馬來酸和富馬酸的方法主要有電位滴定法、分光光度法、離子交換色譜法及高效液相色譜法等。其中高效液楣色譜法分析有機酸具有簡便快速、選擇性好、準確度高等優點。
近年來測定馬來酸和富馬酸的文獻主要針對標準品、廢水、發酵液、葡萄酒及果汁等較簡單的介質,而對淀粉及相關食品中馬來酸和富馬酸提取及同時測定的方法尚未見報道。本文采用l%氨水一甲醇(1:1)對淀粉、粉絲、粉條、魚丸、生濕面制品等9類食品進行提取,采用反相高效液相色譜法進行分析測定,結果穩定、可靠。
1 實驗部分
1.1儀器與試劑
Waters 2695型高效液相色譜儀,配有二*管陣列檢測器及Empower色譜數據處理系統(美國waters公司);KQ5200超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);3-18K型高速離心機(*高轉速lO000r/min,德國sigIIla公司),Milli-Q純水系統(美國Miuipore公司)。
馬來酸、富馬酸標準物質(德國Dr.Ehrenstofer公司);甲醇(色譜純,美國Fisher公司);磷酸二氫銨(上海試劑二廠)、氨水(淄博化工試劑廠)均為分析純;磷酸(優級純,天津市科密歐化學試劑有限公司);超純水由美國Milli-Q純水系統制備;微孔濾膜(有機系,0.45um)。
1.2 標準溶液的制備
分別精確稱取馬來酸、富馬酸50 mg于50 mL容量瓶中,用水溶解并定容至刻度,充分搖勻后備用。此溶液于4℃冰箱中可儲存3個月。將上述各標準儲備溶液用水配制成0.2、1.0、2.0、5.0、lO.0、50.Oug/ml的混合系列標準溶液,使用前配制。
1.3 樣品前處理
稱取2.5g樣品于25mL比色管中,加入10mL l%氨水-甲醇(1:1)溶液,漩渦混合2min,超聲提取20min。取出放至室溫后用水定容至刻度,充分混勻,7500r/min離心5min。經O.45um有機微孔濾膜過濾后進樣測定。
1.4 色譜條件
色譜柱:色譜柱(4.6 mm×250 mm,5um);流動相:0.03 moL/L NH4H2P04(用磷酸調至pH 2.45);流速1.0mL/min;進樣體積10uL;柱溫30℃;檢測波長210nm。
1.5 定量方法
由于馬來酸酐遇水即生成馬來酸,在提取后實際測得的目標物為馬來酸,故本方法以馬來酸為標準品采用外標法定量,淀粉及相關食品中的馬來酸和馬來酸酐總含量以馬來酸計。淀粉及相關食品中富馬酸的含量也采用外標法定量。
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