作者:宋檢 時間:2022-10-21 來源:互聯(lián)網(wǎng)
現(xiàn)有的測定馬來酸和富馬酸的方法主要有電位滴定法、分光光度法、離子交換色譜法及高效液相色譜法等。其中高效液楣色譜法分析有機(jī)酸具有簡便快速、選擇性好、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點。
近年來測定馬來酸和富馬酸的文獻(xiàn)主要針對標(biāo)準(zhǔn)品、廢水、發(fā)酵液、葡萄酒及果汁等較簡單的介質(zhì),而對淀粉及相關(guān)食品中馬來酸和富馬酸提取及同時測定的方法尚未見報道。本文采用l%氨水一甲醇(1:1)對淀粉、粉絲、粉條、魚丸、生濕面制品等9類食品進(jìn)行提取,采用反相高效液相色譜法進(jìn)行分析測定,結(jié)果穩(wěn)定、可靠。
1 實驗部分
1.1儀器與試劑
Waters 2695型高效液相色譜儀,配有二*管陣列檢測器及Empower色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(美國waters公司);KQ5200超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);3-18K型高速離心機(jī)(*高轉(zhuǎn)速lO000r/min,德國sigIIla公司),Milli-Q純水系統(tǒng)(美國Miuipore公司)。
馬來酸、富馬酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(德國Dr.Ehrenstofer公司);甲醇(色譜純,美國Fisher公司);磷酸二氫銨(上海試劑二廠)、氨水(淄博化工試劑廠)均為分析純;磷酸(優(yōu)級純,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司);超純水由美國Milli-Q純水系統(tǒng)制備;微孔濾膜(有機(jī)系,0.45um)。
1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
分別精確稱取馬來酸、富馬酸50 mg于50 mL容量瓶中,用水溶解并定容至刻度,充分搖勻后備用。此溶液于4℃冰箱中可儲存3個月。將上述各標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液用水配制成0.2、1.0、2.0、5.0、lO.0、50.Oug/ml的混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,使用前配制。
1.3 樣品前處理
稱取2.5g樣品于25mL比色管中,加入10mL l%氨水-甲醇(1:1)溶液,漩渦混合2min,超聲提取20min。取出放至室溫后用水定容至刻度,充分混勻,7500r/min離心5min。經(jīng)O.45um有機(jī)微孔濾膜過濾后進(jìn)樣測定。
2 色譜條件
色譜柱:色譜柱(4.6 mm×250 mm,5um);流動相:0.03 moL/L NH4H2P04(用磷酸調(diào)至pH 2.45);流速1.0mL/min;進(jìn)樣體積10uL;柱溫30℃;檢測波長210nm。
3 定量方法
由于馬來酸酐遇水即生成馬來酸,在提取后實際測得的目標(biāo)物為馬來酸,故本方法以馬來酸為標(biāo)準(zhǔn)品采用外標(biāo)法定量,淀粉及相關(guān)食品中的馬來酸和馬來酸酐總含量以馬來酸計。淀粉及相關(guān)食品中富馬酸的含量也采用外標(biāo)法定量。
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