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高效液相色譜實驗技術(shù)疑難問題解答

作者:宋檢 時間:2022-10-25 來源:互聯(lián)網(wǎng)

  1.高效液相色譜是如何實現(xiàn)高效、快速、靈敏的?

  答:氣相色譜理論和技術(shù)上的成就為液相色譜的發(fā)展創(chuàng)造條件,從它的高效、高速和高靈敏渡得到啟發(fā),采用四微粒出定相以提高柱效,采用高壓泵加快液體流動相的流速;設計高靈敏度、死體積小的紫外、熒光等檢測器,提高檢測靈敏度,克服經(jīng)典液相色譜曲缺點,從而達到高效、快速、靈敏。


  2.與氣相色譜法相比高效液相色譜有哪些優(yōu)點和不足

  答:氣相色譜的分析對象是在校溫下具有一定的揮發(fā)性、對熱穩(wěn)定購物質(zhì)。因此它只限于分析氣體和沸點低的化合物或揮發(fā)性的衍生物。而高效液相色譜由于以液體作為流動相,只要被分析的物質(zhì)在選用的流動相中有一定的按解度,便可以分析,所以適用性廣,不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,特別適合于那些沸點高、*性強、熱穩(wěn)定性差的化合物,例如,生化物質(zhì)和藥物、離子型化合物、熱穩(wěn)定性差的天然產(chǎn)物等。在目前已知的有機化臺物中,只有20%樣品可不經(jīng)化學處理而能滿意地用氣相色譜分離,80%的有機化合物要用高效液相色譜分析。


  氣相色譜中流動相是惰性的,它對組分沒有作用力,僅起運載作用、而高效液相色譜的流動相不僅起運載作用,而且流動相對組分有一定親合力,可以通過改變流動相種類和組成提高分離的選擇性,另外可作流動相的化合物多,選擇余地廣。


  與氣相色譜相比,高效液相色譜的另一個優(yōu)點是樣品的回收比較容易,只要開口容器放在柱子末端,就可以很容易地將所分離的各組分收集。回收是定量的,可以用來提純和制備具有足夠純度的單一物質(zhì)。


  高效液相色譜不足的是,日前檢測器的靈敏度不及氣相色譜。必須特別注意“柱外效應”對柱效率及色譜分離的影響。

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