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微生物常規(guī)鑒定技術(shù)

作者:宋檢 時(shí)間:2022-11-02 來源:互聯(lián)網(wǎng)

微生物生化反應(yīng)是指用化學(xué)反應(yīng)來測定微生物的代謝產(chǎn)物,生化反應(yīng)常用來鑒別一些在形態(tài)和其它方面不易區(qū)別的微生物。因此微生物生化反應(yīng)是微生物分類鑒定中的重要依據(jù)之一。


微生物檢驗(yàn)中常用的生化反應(yīng)有:

1、糖酵解試驗(yàn)

不同微生物分解利用糖類的能力有很大差異,或能利用或不能利用,能利用者,或產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣。可用指示劑及發(fā)酵管檢驗(yàn)。

試驗(yàn)方法:以無菌操作,用接種針或環(huán)移取純培養(yǎng)物少許,接種于發(fā)酵液體培養(yǎng)基管,若為半固體培養(yǎng)基,則用接種針作穿刺接種。接種后,置36±1.0°C培養(yǎng),每天觀察結(jié)果,檢視培養(yǎng)基顏色有無改變(產(chǎn)酸),小倒管中有無氣泡,微小氣泡亦為產(chǎn)氣陽性,若為半固體培養(yǎng)基,則檢視沿穿刺線和管壁及管底有無微小氣泡,有時(shí)還可看出接種菌有無動(dòng)力,若有動(dòng)力、培養(yǎng)物可呈彌散生長。

本試驗(yàn)主要是檢查細(xì)菌對各種糖、醇和糖苷等的發(fā)酵能力,從而進(jìn)行各種細(xì)菌的鑒別,因而每次試驗(yàn),常需同時(shí)接種多管。一般常用的指示劑為酚紅、溴甲酚紫,溴百里藍(lán)和An-drade指示劑。


2、淀粉水解試驗(yàn)

某些細(xì)菌可以產(chǎn)生分解淀粉的酶,把淀粉水解為麥芽糖或葡萄糖。淀粉水解后,遇碘不再變藍(lán)色。

試驗(yàn)方法:以18~24h的純培養(yǎng)物,涂布接種于淀粉瓊脂斜面或平板(一個(gè)平板可分區(qū)接種,試驗(yàn)數(shù)種培養(yǎng)物)或直接移種于淀粉肉湯中,于36±1°C培養(yǎng)24~48h,或于20°培養(yǎng)5天。然后將碘試劑直接滴浸于培養(yǎng)表面,若為液體培養(yǎng)物,則加數(shù)滴碘試劑于試管中。立即檢視結(jié)果,陽性反應(yīng)(淀粉被分解)為瓊脂培養(yǎng)基呈深藍(lán)色、菌落或培養(yǎng)物周圍出現(xiàn)無色透明環(huán)、或肉湯顏色無變化。陰性反應(yīng)則無透明環(huán)或肉湯呈深藍(lán)色。

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