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赭曲霉毒素的高效液相色譜HPLC檢測方案

作者:宋檢 時間:2022-11-21 來源:互聯網

赭曲霉毒素由曲霉菌,如赭曲霉、硫色曲霉、蜂蜜曲霉以及綠青霉等產生的一類毒素。

包括7種結構類似的化合物,結構通式:R1=Cl或H;R2=H、CH3或C2H5。其中赭曲霉毒素A(R1=C1,R2=H)毒性*大,在霉變谷物、飼料等*常見。

赭曲霉毒素A是一種無色結晶化合物。可溶于*性有機溶劑和稀碳酸氫鈉溶液。微溶于水。其苯溶劑化物熔點94~96℃,二甲苯中結晶熔點169℃。有光學活性[α]D-118°。其紫外吸收光譜隨pH值和溶劑*性不同而有別,在乙醇溶液中*大吸收波長為213nm和332nm。有很高的化學穩定性和熱穩定性。

赭曲霉毒素A是由多種生長在糧食(小麥、玉米、大麥、燕麥、黑麥、大米和黍類等)、花生、蔬菜(豆類)等農作物上的曲霉和青霉產生的。動物攝入了霉變的飼料后,這種毒素也可能出現在豬和母雞等的肉中。赭曲霉毒素主要侵害動物肝臟與腎臟。這種毒素主要是引起腎臟損傷,大量的毒素也可能引起動物的腸黏膜炎癥和壞死。還在動物試驗中觀察到它的致畸作用。

標準儲備液:準確稱取一定量標準品,用甲醇+乙腈(1+1)溶解,配成0.1mg/ml的標準液。標準工作液:根據使用需要準確吸取一定量的赭曲霉毒素儲備液,用流動相稀釋,分別配成相當于1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml的標準工作液。用0.45µm的有機系濾膜過濾,精密量取10µL,注入液相色譜儀,記錄色譜圖。

樣品處理:準確稱取試樣50.0g(準確到0.1g)于均質器配置的攪拌杯中,加入5.0g氯化鈉,加入100mL甲醇+水(8+2)。將攪拌杯置于均質器上,于20000r/min高速攪拌提取1min。提取液經槽紋折疊濾紙過濾于干凈的燒杯中。準確移取10.0mL濾液并加入40.0mL水稀釋,混合均勻,經玻璃纖維濾紙直接過濾入10mL注射器。

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