氨甲環酸又名傳明酸、凝血酸、止血環酸，化學名反-4-氨甲基環己烷甲酸，是具有溶酶作用的藥物成分。近年來，由于某知名牙膏中添加氨甲環酸事件，使得其走進大眾視野，作為止血藥物被公眾認知。因其出色的止血效果氨甲環酸在醫學上多應用于外科手術止血及創傷出血，隨著在醫學領域的廣泛應用，人們發現它還有一個有趣的“副作用”，那就是美白祛斑。有實驗證明，不僅口服含氨甲環酸的藥物對黃褐斑有治療效果，其外用對色斑仍有效果［1］。現如今，在化妝品領域，氨甲環酸作為一種普遍使用的美白劑，已被多國允許使用在化妝品中，例如歐洲、美國等。我國在《已使用化妝品原料目錄（2015 版）》中也將氨甲環酸列入允許使用的范圍，這更加推動了其發展，在資生堂、歐萊雅等知名品牌以及公眾熟知的國產美白類化妝品中都有添加，屬于常見美白成分。

氨甲環酸的美白機制在于可與體內酪氨酸酶競爭，影響酪氨酸酶對酪氨酸催化作用的代謝，進而抑制酪氨酸酶的活性，或者抑制纖溶酶原轉化為纖溶酶。酪氨酸酶與纖溶酶都是黑色素細胞生成黑色素的重要酶，氨甲環酸通過以上兩種途徑減少或抑制黑色素細胞產生黑色素，從而改善皮膚色素沉積，達到美白淡斑效果［2-6］。國內外有許多文獻已經驗證了氨甲環酸的美白效果，加之媒體、網絡等廣泛傳播，其中不乏有將氨甲環酸奉為“美白神藥”的說辭。而氨甲環酸作為一種廣譜美白劑，并非某些博眼球的商家所鼓吹的“神藥”，苑辰等［7］在治療色素型黑眼圈時外用5%氨甲環酸的產品過程中，約13.8%患者出現一過性的刺激性的接觸性皮炎，1 例出現丘疹停用后好轉。另外，其關鍵品質受有關物質含量控制，品質標準中有關物質含量≤0.5%，若超出標準范圍，經約半年后可能出現產品發黃現象。因此，有關物質含量控制對產品品質保障尤為關鍵［8］。

綜上所述，用于化妝品中氨甲環酸的含量控制是用妝安全的重要環節，應控制在安全有效的范圍內，并非越高越好，同時需要警惕不法商家虛假標注，誤導消費的情況。本實驗經過對不同基質美白化妝品提取檢測，建立高效、快速、靈敏的HPLC-MS/MS檢測方法，為百姓用妝安全、執法監管提供技術支撐。

測試方法
2.1 標準溶液配制
精密稱取氨甲環酸標準品10.00 mg，置100 mL容量瓶中，用超純水溶解稀釋定容至刻度，搖勻，作為標準儲備液，備用。（該溶液4 ℃下保存期為30 d）。再準確移取適量的上述標準儲備液于10 mL容量瓶，制備成標準使用中間液備用。分別吸取適量標準使用中間液置于10 mL 容量瓶中，用80%甲醇配制成5、10、20、30、40 和50 ng/mL 的系列標準工作液，于4 ℃條件下儲存。

2.2 樣品前處理
取樣品0.25 g，精密稱定，置25 mL 具塞比色管中，加40%乙腈水溶液20 mL，渦旋至樣品完全分散，超聲15 min，冷卻至室溫后用40%乙腈水溶液定容至25 mL，搖勻，以5 000 r/min 離心5 min，上清液過0.22 μm 濾膜，備用。

2.3 儀器條件
2.3.1 液相色譜條件 Agilent XDB-C18 色譜柱（4.6 mm×50 mm，1.8 μm）；柱溫：30 ℃；進樣量：2 μL；流動相：A（水）∶B（甲醇）=80∶20；流速：0.4 mL/min。

2.3.2 質譜條件 離子源：ESI 源；掃描方式：正離子模式掃描；掃描范圍：100～1 000 m/z；噴霧電壓：4 500 V；干燥氣溫度：450 ℃；干燥氣流速：1 000 L/h；離子源氣體1∶60.0 psi；離子源氣體2∶55.0 psi；氣簾氣：20.0 psi；碰撞氣：6 psi；入口電壓：10.0 V；質譜采集參數見表1。

結果與討論
3.1 色譜條件的選擇
試驗考察了40%甲醇-水、50%甲醇-水、60%甲醇-水、80%甲醇-水以及40%乙腈-水、50%乙腈-水、60%乙腈-水、80%乙腈-水作為流動相體系時對目標物的色譜分離情況。結果表明：以甲醇-水體系、乙腈-水體系為流動相時，氨甲環酸目標峰均可有效分離，尤其是使用80%甲醇-水溶液時，目標峰峰形尖銳對稱，響應信號強度*高，在2 min 內可以完成出峰且無干擾峰出現。

3.2 質譜條件的選擇
本試驗采用快速液相色譜-API 4000 串聯質譜儀分析系統，ESI 離子源，采用多反應監測方式檢測。實驗中，對質譜的采集模式（Positive 與Negative），質譜的采集條件包括錐孔電壓（Cone）、去簇電壓（DP），選擇提取離子（定性離子和定量離子）及其碰撞能量（CE）等進行了充分優化，獲得優化結果。

3.3 提取溶劑的選擇
氨甲環酸*性較強，在水中易溶，適合用一定比例水溶液進行提取，本實驗分別考察甲醇、乙腈、乙醇在不同比例（20%、40%、80%）情況下對樣品的提取效果。結果表明，氨甲環酸回收率均在80.4%～118.5%之間，其中40%乙腈作為提取溶劑時，低、中、高水平添加回收率在95.4%～97.6%之間，*接近****，且相對標準偏差小于10%，選擇40%乙腈作為提取溶劑效果*佳。

3.4 線性關系
實驗考察氨甲環酸的線性行為，精密吸取濃度范圍為5～50 μg/L 的系列標準溶液，記錄峰面積，以質量濃度（X）為橫坐標，對應峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線。結果顯示：氨甲環酸在5～50 μg/L 范圍內與其峰面積呈良好線性關系，線性回歸方程為Y=4 761.3X+4 134.2，線性相關系數r=0.999 9。

3.5 基質效應考察
實驗選擇市售6 種不同基質、不含目標物質的美白化妝品，分別為霜、水、乳、精華、膏、面膜，以不同基質樣品待測溶液配制氨甲環酸標準溶液和用80%甲醇作為稀釋劑配制氨甲環酸標準溶液，比較上述標準溶液的質譜相應情況。基質效應（ME）的計算等于基質標準溶液與對應濃度的80%甲醇溶液配制氨甲環酸標準溶液質譜響應百分比減去100，若結果為負值，則為基質抑制，若結果為正值，則為基質增強［9］。結果顯示：上述6 種不同基質標準溶液基質效應增強或抑制效果均不明顯（-5.3%～1.8%），與80%甲醇溶液配制標準溶液質譜響應基本一致，因此認為該方法基本不存在基質效應。

3.6 回收率試驗與精密度
分別選取美白爽膚水、美白乳、美白霜、美白精華、美白面膜、美白潔面膏六種類型陰性產品，按照試驗方法分析，并進行加標實驗。設定高、中、低添加水平，平行試驗6 份。記錄待測物色譜峰面積，計算回收率和相對標準偏差（RSD）。結果表明，建立的方法對不同基質美白化妝品具有良好的回收率，相對標準偏差均小于10%。
選取目標物質含量為6.35 μg/g 的陽性樣品，按照實驗方法重復測定6 次，計算精密度，結果表明，陽性樣品含量為6.35 μg/g（氨甲環酸檢出），RSD 值為0.5%。取陰性樣品6 份，加入氨甲環酸對照品溶液（0.1 μg/g）按試驗方法測定，計算精密度，結果表明，樣品含量為0.098 μg/g，RSD 值為1.2%。試驗結果表明，方法精密度良好，滿足實驗要求。

3.7 檢出限與定量限
取不含目標物質的陰性樣品適量，精密稱定，加入不同體積的氨甲環酸標準溶液，按照試驗方法測定，選擇3 倍信噪比（S/N=3）時的標準溶液濃度為儀器檢出限，選擇10 倍信噪比（S/N=10）時的標準溶液濃度為定量限。本方法氨甲環酸的檢出限為0.1 μg/kg，定量限為0.3 μg/kg。

3.8 實際樣品分析
隨機選取市售美白類化妝品48 批，其中包含美白乳液10 批、美白面霜10 批、美白潤膚水7 批、美白精華10 批、美白面膜5 批、美白潔面膏6 批。按試驗方法進行分析，結果顯示：陰性樣品分析未見干擾成分，各品類均有陽性樣品檢出，檢出率高達27.1%，檢出含量范圍在0.02～1 231.60 mg/kg之間。含量較高類別為精華類，面霜類、乳液類、面膜類、潤膚水、潔面膏含量差異較小，低于精華類。可見，氨甲環酸作為一種美白劑被廣泛用于化妝品中，可能是美白祛斑功效的核心成分。

結論
本實驗研究建立了美白化妝品中氨甲環酸的HPLC-MS/MS 測定方法，通過優化液相方法和前處理方法實現了有效避免樣品測試中的基質效應、解決雜質干擾問題。方法準確可靠、易于操作、檢測周期短、回收率高，為美白類化妝品中氨甲環酸的監管工作提供技術手段。