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泛JAK抑制劑(Pyridone 6)檢測

作者:荀彧 時間:2022-12-06 來源:互聯網

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泛JAK抑制劑(Pyridone 6)

Pyridone 6

1mL(10mM)|1mg|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

1~3天

商品介紹:

Pyridone6是一種泛JAK抑制劑,有效抑制JAK激酶家族,作用于JAK2,TYK2,JAK3和JAK1,IC50分別為1nM,1nM,5nM和15nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

CAS號:457081-03-7

別名:CMP 6;JAK Inhibitor

純度:98.89%

分子量:309.34

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

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泛JAK抑制劑(Pyridone 6)二甲基烯乙二酯

其他 乙二二甲基烯酯;2-甲基-2-烯-1,2-乙二酯;甲基烯乙二酯;雙甲基烯乙二酯

英文名稱: Ethylene dimethacrylate

其他英文名稱: Ethylene glycol dimethacrylate;1,2-Ethanediol dimethacrylate

產品規格: BR,98%

包  裝: 25毫升/100毫升/500毫升

CAS號:97-90-5

C10H14O4=198.22

級別:BR

含量:≥98%(GC)

折光率:1.4530~1.4550

相對密度:1.051~1.054

值:≤0.5

穩定劑:90~110 ppm MEHQ

性狀:無色透明至淡黃色液體。微溶于水。熔點:-40℃;沸點:98-100℃/5mmHg;密度:1.054;折光率n20/D:1.453-1.455

用途:生化研究。交聯劑,用于制取樹脂、涂料和粘合劑等

保存:2~8℃,避光

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,*后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,*后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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