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大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)Elisa試劑盒檢測(cè)

作者:荀彧 時(shí)間:2022-12-07 來源:互聯(lián)網(wǎng)

大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

規(guī)格:48T 96T

檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4

大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。

大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:

YS01073B 人白介素1(IL-1)Elisa試劑盒
YS01074B 人白介素17(IL-17)Elisa試劑盒
YS01075B 人白介素1β(IL-1β)Elisa試劑盒
YS01076B 人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)Elisa試劑盒
YS01077B 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)Elisa試劑盒
YS01078B 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)Elisa試劑盒
YS01079B 人可溶性E選擇素(sE-selectin)Elisa試劑盒
YS01080B 人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)Elisa試劑盒
YS01081B 人細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2)Elisa試劑盒
YS01082B 人細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3)Elisa試劑盒
YS01083B 人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)Elisa試劑盒
YS01084B 人白介素18(IL-18)Elisa試劑盒
YS01085B 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC)Elisa試劑盒
YS01086B 人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)Elisa試劑盒
YS01087B 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)Elisa試劑盒
YS01088B 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1)Elisa試劑盒
YS01089B 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)Elisa試劑盒
YS01090B 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)Elisa試劑盒
YS01091B 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子A(VEGF-A)Elisa試劑盒
YS01092B 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)Elisa試劑盒
YS01093B 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)Elisa試劑盒
YS01094B 人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)Elisa試劑盒
YS01095B 人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)Elisa試劑盒
YS01096B 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)Elisa試劑盒
YS01097B 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)Elisa試劑盒
YS01098B 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)Elisa試劑盒
YS01099B 人腫瘤壞死因子β(TNF-β)Elisa試劑盒
YS01100B 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)Elisa試劑盒
YS01101B 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)Elisa試劑盒
YS01102B 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)Elisa試劑盒
YS01103B 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)Elisa試劑盒
YS01104B 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)Elisa試劑盒
YS01105B 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β)Elisa試劑盒
YS01106B 人干細(xì)胞因子受體(SCFR)Elisa試劑盒
YS01107B 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)Elisa試劑盒
YS01108B 人可溶性CD40配體(sCD40L)Elisa試劑盒
YS01109B 人可溶性CD30配體(sCD30L)Elisa試劑盒
YS01110B 人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES)Elisa試劑盒
YS01111B 人P選擇素(P-Selectin)Elisa試劑盒
YS01112B 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)Elisa試劑盒
YS01113B 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)Elisa試劑盒
YS01114B 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)Elisa試劑盒
YS01115B 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)Elisa試劑盒
YS01116B 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)Elisa試劑盒
YS01117B 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β)Elisa試劑盒
YS01118B 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α)Elisa試劑盒
YS01119B 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β)Elisa試劑盒
YS01120B 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α)Elisa試劑盒
YS01121B 人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC)Elisa試劑盒
YS01122B 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)Elisa試劑盒
YS01123B 人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3)Elisa試劑盒
YS01124B 人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2)Elisa試劑盒
YS01125B 人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)Elisa試劑盒
YS01126B 人L選擇素(L-SelectinL)Elisa試劑盒
YS01127B 人白介素9(IL-9)Elisa試劑盒
YS01128B 人白介素8(IL-8)Elisa試劑盒
YS01129B 人白介素6(IL-6)Elisa試劑盒
YS01130B 人白介素-5(IL-5)Elisa試劑盒
YS01131B 人白介素4(IL-4)Elisa試劑盒
YS01132B 人白介素3(IL-3)Elisa試劑盒

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