警告：丙烯基硫服屬于有毒化合物，操作時(shí)應(yīng)按規(guī)定要求佩戴防護(hù)器具，避免接觸皮膚和衣服；標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行操作；檢測(cè)后的殘?jiān)鼩堃簯?yīng)做妥善的安全處理。

1 適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中五日生化需氧量℃的暗處培養(yǎng)5d士4h或 d±4h[先在0-4℃的暗處培養(yǎng)2d，接著在℃的暗處培養(yǎng)5d，即培養(yǎng) d]，分別測(cè)定培養(yǎng)前后水樣中溶解氧的質(zhì)量濃度，由培養(yǎng)前后溶解氧的質(zhì)量濃度之差，計(jì)算每升樣品消耗的溶解氧量，以BOD5形式表示。

若樣品中的有機(jī)物含量較多，BOD5的質(zhì)量濃度大于6mg/L，樣品需適當(dāng)稀釋后測(cè)定；對(duì)不含或含微生物少的工業(yè)廢水，如酸性廢水、堿性廢水、高溫廢水、冷凍保存的廢水或經(jīng)過(guò)氯化處理等的廢水，在測(cè)定BOD5時(shí)應(yīng)進(jìn)行接種，以引進(jìn)能分解廢水中有機(jī)物的微生物。當(dāng)廢水中存在難以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有機(jī)物或含有劇毒物質(zhì)時(shí)，應(yīng)將馴化后的微生物引入水樣中進(jìn)行接種。

4 試劑和材料

本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純化學(xué)試劑。

4.1 水：實(shí)驗(yàn)用水為符合GB/T 6682規(guī)定的3級(jí)蒸餾水，且水中銅離子的質(zhì)量濃度不大于0.01 mg/L, 不含有氯或氯胺等物質(zhì)。

4.2 接種液：可購(gòu)買(mǎi)接種微生物用的接種物質(zhì)，接種液的配制和使用按說(shuō)明書(shū)的要求操作。也可按以下方法獲得接種液。

4.2.1 未受工業(yè)廢水污染的生活污水：化學(xué)需氧量不大于300mg/L，總有機(jī)碳不大于100 mg/L。4.2.2 含有城鎮(zhèn)污水的河水或湖水。

4.2.3 污水處理廠的出水。

4.2.4分析含有難降解物質(zhì)的工業(yè)廢水時(shí)，在其排污口下游適當(dāng)處取水樣作為廢水的馴化接種液。也可取中和或經(jīng)適當(dāng)稀釋后的廢水進(jìn)行連續(xù)曝氣，每天加入少量該種廢水，同時(shí)加入少量生活污水，使適應(yīng)該種廢水的微生物大量繁殖。當(dāng)水中出現(xiàn)大量的絮狀物時(shí)，表明微生物己繁殖，可用作接種液。一般馴化過(guò)程需3-8d。

4.3 鹽溶液

4.3.1磷酸鹽緩沖溶液：將8.5g磷酸二氫鉀（kH2PO4)、21.8g磷酸氫二鉀（K2HPO4)、 33.4g七水合磷酸氫二鈉（Na2HPO4?7H2O）和1.7 g氯化銨溶于水中，稀釋至1 000 ml，此溶液在0~4℃可穩(wěn)定保存6個(gè)月。此溶液的pH值為7.2。

4.3.2硫酸鎂溶液，ρ= 11.0g/L：將22.5 g七水合硫酸鎂（MgSO4?7H2O）溶于水中，稀釋至1 000 ml，此溶液在0~4℃可穩(wěn)定保存6個(gè)月，若發(fā)現(xiàn)任何沉淀或微生物生長(zhǎng)應(yīng)棄去。

4.3.3氯化鈣溶液，ρ=27.6 g/L：將27.6g無(wú)水氯化鈣（CaCl2)溶于水中，稀釋至1000 ml, 此溶液在0~4℃可穩(wěn)定保存6個(gè)月，若發(fā)現(xiàn)任何沉淀或微生物生長(zhǎng)應(yīng)棄去。

4.3.4 氯化鐵溶液，ρ ℃，用曝氣裝置至少曝氣1h，使稀釋水中的溶解氧達(dá)到8mg/L以上。使用前每升水中加入上述四種鹽溶液各 1.0 ml,混勻，20℃保存。在曝氣的過(guò)程中防止污染，特別是防止帶入有機(jī)物、金屬、氧化物或還原物。

稀釋水中氧的質(zhì)量濃度不能過(guò)飽和，使用前需開(kāi)口放置1h，且應(yīng)在24 h內(nèi)使用。剩余的稀釋水應(yīng)棄去。

4.5 接種稀釋水：根據(jù)接種液的來(lái)源不同，每升稀釋水：城市生活污水和污水處理廠出水加1~10 ml，河水或湖水加10~100 ml，將接種稀釋水存放在（20±1)℃的環(huán)境中，當(dāng)天配制當(dāng)天使用。接種的稀釋水pH值為7.2, BOD5應(yīng)小于1.5 mg/L。

4.6 鹽酸溶液，c=0.5 mol/L：將40 mL濃鹽酸（HCI)溶于水中，稀釋至1 000ml。4.7氫氧化鈉溶液，C=0.5 mol/L：將20 g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至1 000ml。

4.8 亞硫酸鈉溶液，c=0.25 mol/L：將1.575 g亞硫酸鈉（Na2SO3）溶于水中，稀釋至1 000 ml。此溶液不穩(wěn)定，需現(xiàn)用現(xiàn)配。

4.9 葡萄糖-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：將葡萄糖（C6H12O6，優(yōu)級(jí)純）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH,優(yōu)級(jí)純）在130℃干燥lh，各稱(chēng)取150mg溶于水中，在1 000 ml容量瓶中稀釋至標(biāo)線。此溶液的BOD5 為（210±20) mg/L，現(xiàn)用現(xiàn)配。該溶液也可少量冷凍保存，融化后立刻使用。

4.10 丙烯基硫脈硝化抑制劑，ρ=1.0 g/L：溶解0.20 g丙烯基硫脈于200 ml水中混合，4℃保存，此溶液可穩(wěn)定保存14d。

4.11 乙酸溶液，1+1。

4.12 碘化鉀溶液，ρ =100g/L：將10g碘化鉀（KI）溶于水中，稀釋至100ml。4.13 淀粉溶液，ρ =5g/L：將0.50g淀粉溶于水中，稀釋至100ml。

5 儀器和設(shè)備 本標(biāo)準(zhǔn)除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國(guó)家A級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的玻璃量器。本標(biāo)準(zhǔn)使用的玻璃儀器須清潔、 無(wú)毒性和可生化降解的物質(zhì)。

5.1 濾膜：孔徑為1.6μm。

5.2 溶解氧瓶：帶水封裝置，容積250~300 ml。

5.3 稀釋容器：1000~2000 ml的量筒或容量瓶。

5.4 虹吸管：供分取水樣或添加稀釋水。