發光劑是指在發光反響中介入能量轉移并以發射光子的情勢產生能量的化合物，依據發光特色分為化學發光劑、生物發光劑和熒光素3種。物資由電子激起態到基態，產生的能量稱為發光，表示為光的發射。依據構成激起態份子的激起能可將發光分為:化學發光、生物發光和光照發光。

電化學發光劑是指在電*外面舉行電化學反響而收回光的物資。電子供體3丙胺和3聯吡啶釕在陽性電*外面成為強氧化劑，可將2價變成3價，丟失1個電子產生氧化反響。電子失去后被氧化成陽離子自由基，可自覺地丟失質子，成為很強的復原劑，很不穩固。可將1個高能量的電子遞給3價的使其構成激起態的2價。激起態的3聯吡啶釕不穩固，很快發射出1個光子，到基態的3聯吡啶釕。這個進程可在電*外面循環往復地舉行，發生很多光子。 直接化學發光劑只需轉變溶液的pH值等前提就可以發光的物資，不需酶的催化感化。如吖啶酯在有過氧化氫的稀堿溶液中即能發光。

經常使用的酶發光劑有酶促反響的發光底物。是指經酶的降解感化而收回光的發光底物，化學發光酶免疫技巧中經常使用的酶有堿性磷酸酶和辣根過氧化物酶。為對-羥基苯乙酸和魯米諾或其衍生物以及4-（2-螺旋金剛烷⑷-甲氧基⑷-甲基⑷-（4-磷酸氧基）-苯基⑴，2-2氧乙烷和4-甲基傘形酮磷酸鹽。對-羥基苯乙酸可用熒光光度計丈量。魯米諾的氧化反響在堿性緩沖液中舉行，平日以緩沖液作底物液。要留意是:起首,魯米諾和H2O2在無HRP催化時也能遲緩自覺發光，而在末了光強度測定中形成空缺滋擾，因此宜分離配制成2瓶試劑溶液，只在用前混雜;其次, 如鄰－碘酚試劑或熒光素酶可加強催化魯米諾氧化的反響和延伸發光時光，進步發光敏感度。