病毒殺滅試驗的實驗方法：以生活飲用水和人工游泳池水消毒為例
作者：百檢網 時間：2021-11-02 來源：互聯網
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(1)大腸桿菌(8099)懸液。取37℃培養18h~24 h的新鮮大腸桿菌斜面，用生理鹽水洗下菌苔，混勻后再用生理鹽水適當稀釋，配制成試驗用大腸桿菌懸液。
(2)微孔濾膜濾器和濾膜(濾膜孔徑為 0.45um~0.65 um，濾膜大小示濾器型號確定，目前常用有直徑為35 mm和 47 mm 兩種)。
(3)抽濾水泵或氣泵。
(4)恒溫水浴箱。
(5)秒表。
(6)三角燒瓶。
(7)廣口玻璃瓶（500ml)。
(8）無齒鑷子。
(9)品紅亞硫酸鈉培養基。
(10)中和劑。
(11)細菌定量殺滅試驗用其他器材。
(12)天然水樣。
(13)模擬現場消毒裝置。
(14)磁力攪拌器。
病毒殺滅試驗的試驗階段
飲用水消毒效果的鑒定應經過實驗室殺菌試驗，天然水樣消毒試驗兩個階段的檢測。實驗室試驗的目的是以大腸桿菌為試驗菌，用懸液定量殺菌試驗法測出在試管中消毒所需的劑量。天然水樣消毒試驗是由自然水體取樣，進一步驗證受試消毒劑或方法對成分較復雜的天然水的消毒效果。對用于較大水體(如人工游泳池水、高層建筑二次供水)消毒的設備和方法，必要時尚需進行模擬現場或現場試驗，以進一步驗證其消毒效果。
由于生活飲用水的衛生標準，除微生物外還需考慮化學污染等方面，因此對其安全評價尚需由有關專業單位對其他條件，例如化學物質含量和 pH值等，進行檢測和判定，以對所鑒定的消毒劑或器械做出合格與否的綜合評價。
病毒滅殺試驗：實驗室操作程序
1）試驗分組：分為試驗組、陽性對照組、陰性對照組；
2）操作程序：先配制試驗菌污染水樣，再將裝有試驗菌污染水樣的三角燒瓶放入恒溫水浴箱(20℃±2℃)中，開動磁力攪拌器，使細菌在水中分布均勻。先取2份試驗菌污染水樣，進行大腸桿菌活菌計數(陽性對照組)。待水樣的溫度恒定后加入消毒劑，迅速攪拌均勻。從開始加消毒劑起計時，按規定時間吸取水樣，注入裝有中和劑的無菌三角燒瓶中，以終止消毒作用。將中和后水樣，分別取 100 ml，10 ml，1 ml各2份，進行大腸桿菌的活菌培養計數。將未接種大腸桿菌的試驗用同批培養基平板2個，置溫箱中培養(陰性對照組)。試驗重復3次。
3）結果評價：當陽性對照組平均菌量在5x 104 cfu/100 ml~5 x 105 cfu/100 ml，陰性對照組均無菌生長時。在3次試驗中均使大腸桿菌下降至0/100 ml的*低劑量,可判定為實驗室試驗中飲水消毒*低有效劑量。若陽性對照和陰性對照未達上述要求，應尋找原因，糾正后重做試驗。
病毒滅殺試驗：人工游泳池水消毒效果鑒定
1)水樣采集。游泳池水面≤1000 m2，設2個采樣點，超過1000m2的，設3個采樣點。
2）鑒定時應在暑季游泳人員處于高峰期時進行。室內游泳池可根據情況在其他季節進行，但亦應在游泳人員的高峰期。
3)采樣時，使用無菌玻璃瓶在水面下 30 cm 深處采集。再將水樣加入有適量鑒定合格的中和劑溶液的無菌玻璃瓶中。每點采1個樣本。每日采2次，一次在清晨消毒前(作為陽性對照)，一次在消毒后當日游泳人員高峰時，作為消毒后樣本。
4)試驗劑量選用說明書規定者。對樣本，應檢測細菌總數和大腸菌群數。使用含氯消毒劑時，還應測定水中的剩余氯含量。檢測方法按《公共場所衛生標準監測檢驗方法》中的規定進行。
5）消毒后樣本檢測結果，細菌總數應≤1000cfu/ml，大腸菌群≤18cfu/L(見游泳場所衛生標準))。
6)檢測按日重復5 次。5次全部符合上述要求者可判為合格。
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