性激素測(cè)試
作者：百檢網(wǎng) 時(shí)間：2021-12-06 來(lái)源：互聯(lián)網(wǎng)
1 范圍本規(guī)范規(guī)定了測(cè)定化妝品中雌三醇等7 種性激素的高效液相色譜-二*管陣列檢測(cè)器法、高效液相色譜-紫外檢測(cè)器/熒光檢測(cè)器法和氣相色譜/質(zhì)譜鑒定法。本規(guī)范適用于化妝品中雌三醇等7 種性激素的檢測(cè)和鑒定。**法 高效液相色譜-二*管陣列檢測(cè)器法2 方法提要以有機(jī)溶劑提取化妝品中的性激素，用高效液相色譜儀進(jìn)行分析，以保留時(shí)間和紫外吸收光譜圖或熒光光譜圖定性，以峰面積進(jìn)行定量。各激素的檢出限及取1g 樣品時(shí)的檢出濃度見(jiàn)表1。表1 各激素的檢出限和檢出濃度激素組分 雌三醇 雌酮 己烯雌酚雌二醇睪丸酮甲基睪丸酮 黃體酮檢出限，μg 0.02 0.04 0.01 0.02 0.002 0.002 0.003檢出濃度，μg/g 40 80 20 40 4 4 63 試劑本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑除另有說(shuō)明外，均為優(yōu)級(jí)純?cè)噭?.1 甲醇。3.2 飽和氯化鈉溶液。3.3 環(huán)己烷。3.4 硫酸 [?（H2SO4）＝2％]：取硫酸（ρ20＝1.84g/mL）2mL，緩慢加入到98mL 水中，混勻。3.5 激素標(biāo)準(zhǔn)溶液3.5.1 雌激素標(biāo)準(zhǔn)溶液[ρ（雌酮、雌二醇、雌三醇、己烯雌酚）＝2g/L]：分別稱取雌酮、雌二醇、雌三醇、己烯雌酚各0.200g，用少量甲醇（3.1）溶解，移至100mL 容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度。3.5.2 雄激素標(biāo)準(zhǔn)溶液[ρ（睪丸酮、甲基睪丸酮）＝600mg/L]：分別稱取睪丸酮、甲基睪丸酮各0.600g，用少量甲醇（3.1）溶解，轉(zhuǎn)移至100mL 容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度。1mL此溶液含以上兩種雄激素6.00mg。移取此標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0mL 置于100mL 容量瓶中，用甲醇（3.1）稀釋到刻度。3.5.3 孕激素標(biāo)準(zhǔn)溶液[ρ（黃體酮）＝600mg/L]：稱取黃體酮0.600g，用少量甲醇（3.1）溶解，轉(zhuǎn)移至100mL 容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度。1mL 此溶液含孕激素6.00mg。移取此標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0mL 置于100mL 容量瓶中，用甲醇（3.1）稀釋到刻度。2213.5.4 混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：分別移取雌激素標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.5.1）50.0mL，雄激素標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.5.2）5.00mL 和孕激素標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.5.3）5.00mL 置于100mL 容量瓶中，用甲醇（3.1）稀釋到刻度。1mL 此溶液分別含4 種雌激素各1.00mg、2 種雄激素各30.0μg 和1 種孕激素30.0μg。4 儀器4.1 高效液相色譜儀，具等容泵、二*管陣列檢測(cè)器或熒光檢測(cè)器。4.2 離心機(jī)。4.3 具塞比色管，10mL。5 分析步驟5.1 樣品預(yù)處理5.1.1 溶液狀樣品：準(zhǔn)確稱取樣品1g～2g 于10mL 具塞比色管中，在水浴上餾除乙醇等揮發(fā)性有機(jī)溶劑，用甲醇（3.1）稀釋到10mL，備用。5.1.2 膏狀、乳狀樣品：準(zhǔn)確稱取樣品1g～2g 于100mL 錐形瓶中，加入飽和氯化鈉溶液（3.2）50mL，硫酸（3.4）2mL，振蕩溶解后轉(zhuǎn)移至100mL 分液漏斗。以環(huán)己烷（3.3）30mL 分三次萃取，必要時(shí)離心分離。合并環(huán)己烷并在水浴上餾除。用甲醇（3.1）溶解殘留物，轉(zhuǎn)移到10mL 具塞比色管中，用甲醇稀釋到刻度?；靹蚝螅?jīng)0.45μm 濾膜過(guò)濾，濾液備用。5.2 色譜參考條件色譜柱：C18 柱，250×4.6mm，10μm；檢測(cè)波長(zhǎng)：二*管陣列檢測(cè)器（雌性激素－204nm，雄性激素－245nm）或熒光檢測(cè)器（激發(fā)波長(zhǎng)280nm，發(fā)射波長(zhǎng)310nm）；流動(dòng)相：甲醇+水=60+40；流速：1.3mL/min；5.3 校準(zhǔn)曲線的制備移取激素標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（3.5.4）0.00、1.00、2.00、5.00mL 置于10mL 具塞比色管中，用甲醇（3.1）稀釋到刻度。調(diào)節(jié)儀器到*佳狀態(tài)，取樣5μL 注入高效液相色譜儀，以標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積繪制校準(zhǔn)曲線。5.4 測(cè)定取待測(cè)溶液5μL 注入高效液相色譜儀，根據(jù)峰的保留時(shí)間和紫外吸收光譜圖或熒光光譜圖定性，根據(jù)峰面積從曲線上查出待測(cè)溶液中激素的質(zhì)量濃度。6 計(jì)算ρ×Vω（激素）=m式中：ω（激素）——樣品中激素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，μg/g；ρ——從曲線上查出測(cè)試溶液中激素的質(zhì)量濃度，mg/L；V——樣品定容體積，mL；m——樣品取樣量，g。2227 色譜圖第二法 高效液相色譜-紫外檢測(cè)器法/熒光檢測(cè)器法8 方