作者:百檢網 時間:2022-04-15 來源:互聯(lián)網
酶活性指的是有機體的生命活動表現了它內部化學反應歷程的有序性,這種有序性是受多方面因素調節(jié)的,一旦破壞了這種有序性,就會導致代謝紊亂,產生疾病,甚至死亡。酶活力受到調節(jié)和控制是區(qū)別于一般催化劑的重要特征。酶活性檢測去哪里做?百檢網可對各類樣品的酶活性進行檢測,獨立的第三方檢測實驗室,出具第三方酶活性檢測報告。
酶活性檢測范圍
飼料用大豆制品,辣根過氧化物,飼料用纖維素,幾丁質,谷氨酰胺轉氨酶,絡氨酸酶活性,酶制劑,乳清粉等。
檢測方法
分光光度法,濾紙法。
酶活性檢測標準
1GB/T 5521-2008糧油檢驗 谷物及其制品中α-淀粉酶活性的測定 比色法
2GB/T 8622-2006飼料用大豆制品中尿素酶活性的測定
3GB/T 156 0190 2607-2009飼用植酸酶活性的測定 分光光度法
4GB/T 23881-2009飼用纖維素酶活性的測定 濾紙法
5GB/T 30990-2014溶菌酶活性檢測方法
6GB/T 32131-2015辣根過氧化物酶活性檢測方法比色法
7GB/T 33409-2016β-半乳糖苷酶活性檢測方法 分光光度法
8GB/T 34795-2017谷氨酰胺轉胺酶活性檢測方法
9GB/T 34799-2017幾丁質酶活性檢測方法
10GB/T 35808-2018林業(yè)生物質原料分析方法 纖維素酶活性測定
測定方法
酶活力測定常用的方法有終點法和動力學方法兩類。
終點法
測定完成一定量反應所需的時間,如α-淀粉酶的活力測定。因為碘對淀粉呈現藍色反應,當淀粉溶液中加入淀粉酶后,碘的藍色反應消失而呈現紅棕色;碘對淀粉顏色反應消失的時間可表示淀粉酶活力的大小。碘對淀粉顏色反應消失花的時間越短,表示酶的活力越高。
動力學方法
測定一定時間內所起的化學反應量。
①比色法 如果酶反應的產物可與特定的化學試劑反應而生成穩(wěn)定的有色溶液,且生成顏色的深淺與產物的濃度在一定的范圍內有線性關系可用此法。如蛋白酶的活力測定:蛋白酶可水解酪蛋白,產生的酪氨酸可與福林試劑反應生成穩(wěn)定的藍色化合物,在一定的濃度范圍內,所生成藍色化合物顏色的深淺與酪氨酸的量之間有線性關系,可用于定量測定。
②量氣法 主要用于有氣體產生的酶促反應。如氨基酸脫羧酶、脲酶的活力測定。產生的二氧化碳量可用特制的儀器如瓦氏呼吸儀測定之。根據氣體變化和時間的關系,即可求得酶反應的速度。
③滴定法 如果產物之一是自由的酸性物質可用此法。如脂肪酶催化脂肪水解,脂肪酸的增加量代表脂肪酶的活力。
④分光光度法 利用底物和產物光吸收性質的不同,可直接測定反應混合物中底物的減少量或產物的增加量。幾乎所有的氧化還原酶都使用該法測定。如還原型輔酶Ⅰ(NADH2)和輔酶Ⅱ(NADPH2)在340nm有吸收,而NAD和NADP在該波長下無吸收,脫氫酶類可用該法測定。該法測定迅速簡便,自動掃描分光光度計的使用對酶活力的快速準確的測定提供的*大的方便。
⑤放射測量法 是酶活力測定中較常用的一種方法。一般用放射性同位素標記底物,在反應進行到一定程度時,分離帶放射性同位素標記的產物并進行測定,就可測知反應進行的速度。常用的同位素有3H,14C,32P,35S,131I等。如脲酶,將底物尿素用14C標記,產生的帶放射性的CO2氣體可用標準計數法進行測定。
⑥酶偶聯(lián)分析 某些酶本身沒有合適的測定方法,但可偶聯(lián)另一個酶反應進行測定。其基本方法為:應用某一高度專一性的工具酶使被測酶反應能繼續(xù)進行到某一可直接連續(xù)且簡便準確測定階段的方法。如:被測E1反應的產物B是某一脫氫酶(E2)的底物,向反應體系中加入足量的脫氫酶和NAD+或NADPH+,使反應由A經B繼續(xù)進行到C,然后測定NADH或NADPH的特征吸收光譜的變化,即可間接地測定E1的活力大小。如己糖激酶的活力測定即應用這一方法。注意:使用該法要求指示酶必須很純,且具有高度的專一性,以免干擾反應而給測定帶來麻煩。
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