作者:Lance 時(shí)間:2022-10-11 來源:互聯(lián)網(wǎng)
文中**法和第二法適用于食品(肉制品除外)中淀粉的測(cè)定;第三法適用于肉制品中淀粉的測(cè)定,但不適用于同時(shí)含有經(jīng)水解也能產(chǎn)生還原糖的其他添加物的淀粉測(cè)定。
**法 酶水解法
一、目的與要求:
1、明確與掌握各類食品中淀粉含量的原理及測(cè)定方法。
2、掌握用酶水解法和酸水解法測(cè)定淀粉的方法。
二、原理:
樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后,其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖,再用鹽酸將雙糖水解成單糖,*后按還原糖測(cè)定,并折算成淀粉。
三,試劑:
1、0.5%淀粉酶溶液:稱取淀粉酶0.5克,加100毫升水溶解,數(shù)滴甲苯或三氯甲烷,防止長(zhǎng)霉,貯于冰箱中。
2、碘溶液:稱取3.6克碘化鉀溶于20毫升水中,加入1.3克碘,溶解后加水稀釋至100毫升。
3、乙醚
4、85%乙醇
5、(1+1)鹽酸:量取50毫升鹽酸加水稀釋至100毫升。
6、甲基紅指示液:0.1%乙醇溶液。
7、20%氫氧化鈉溶液。
8、堿性酒石酸銅甲液:稱取34.639克硫酸銅(CuS04·5H2O)。加適量水溶解,加0.5毫升硫酸,再加水稀釋至500毫升,用精制石棉過濾。
9、堿性酒石酸銅乙液:稱取173克酒石酸鉀鈉與50克氫氧化鈉,加適量水溶解,并稀釋至500毫升,用精制石棉過濾,貯存于橡膠塞玻璃瓶?jī)?nèi)。
10、0.1000N高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。
11、硫酸鐵溶液:稱取50克硫酸鐵,加入200毫升水溶解后,加入100毫升硫酸,冷后加水稀釋至1000毫升。
四、操作方法:
1、樣品處理:
稱取2-5克樣品,置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi),先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪,再用約100毫升85%乙醇洗去可溶性糖類,將殘留物移入250毫升燒杯內(nèi),并用50毫升水洗濾紙及漏斗,洗液并入燒杯內(nèi),將燒杯置沸水浴上加熱15分鐘,使淀粉糊化,放冷至60℃以下,加20毫升淀粉酶溶液,在55-60℃保溫1小時(shí),并時(shí)時(shí)攪拌。然后取1滴此液加1滴碘溶液,應(yīng)不顯現(xiàn)藍(lán)色,若顯藍(lán)色,再加熱糊化并加20毫升淀粉酶溶液,繼續(xù)保溫,直至加碘不顯藍(lán)色為止。加熱至沸,冷后移入250毫升容量瓶中,并加水至刻度,混勻,過濾,棄去初濾液。取50毫升濾液,置于250毫升錐形瓶中,加5.00mL(1+1)鹽酸,沸水浴中回流1小時(shí),冷后加2滴甲基紅指示液,用20%氫氧化鈉溶液中和至中性,溶液轉(zhuǎn)入100毫升容量瓶中,洗滌錐形瓶,洗液并人100毫升容量瓶中,加水至刻度,混勻備用。
2、測(cè)定:
吸取5.00mL堿性酒石酸銅甲液及5.00mL乙液置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加入兩粒玻璃珠,從滴定管滴加試樣溶液至錐形瓶中,滴加體積比預(yù)測(cè)少1mL,溶液于2min內(nèi)加熱至沸,保持沸騰狀態(tài)繼續(xù)以每?jī)擅胍坏蔚乃俣鹊味ǎ敝了{(lán)色剛好退去為終點(diǎn),記錄樣液消耗體積。同法平行操作三份,得出平均消耗體積。
當(dāng)濃度過低時(shí),則采取直接加入10.00樣品液,免去加水10mL,再用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn),記錄消耗的體積與標(biāo)定時(shí)消耗的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液體積之差相當(dāng)于10mL樣液中所含葡萄糖的量(mg)。
做試劑空白。
第二法 酸水解法
一、原理:
樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后,其中淀粉用酸水解成具有還原性的
單糖,然后按還原糖測(cè)定,并折算成淀粉。
二、試劑:
1、乙醚;
2、85%乙醇溶液;
3、(1+1)鹽酸溶液;
4、40%氫氧化鈉溶液;
5、10%氫氧化鈉溶液;
6、甲基紅指示液:0.2%乙醇溶液
7、精密PH試紙
8、20%乙酸鉛溶液
9、10%硫酸鈉溶液
10、乙醚
11、堿性酒石酸銅甲液。 (配制見前)
12、堿性酒石酸銅乙液; (配制見前)
13、硫酸鐵; (配制見前)
14、0.1000N高錳酸鉀標(biāo)液
三、儀器:
1、水浴鍋
2、高速組織搗碎機(jī):1200r/min
3、皂化裝置并附250毫升錐形瓶。
四、操作方法:
1、 樣品處理
A、糧食,豆類、糕點(diǎn)、餅干等較干燥的樣品,稱取2.0-5.0克磨碎過40目篩的樣品,置于放有慢速濾紙的漏斗中,用30毫升乙醚分三次洗去樣品中的脂肪,棄去乙醚。再用150毫升85%乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘?jiān)タ扇苄蕴穷愇镔|(zhì)。并濾干乙醇溶液,以100毫升水洗滌漏斗中殘?jiān)⑥D(zhuǎn)移至250毫升錐形瓶中,加入30毫升(1+1)鹽酸,接好冷凝管,置沸水浴中回流2小時(shí)。回流完畢后,立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻后,加入2滴甲基紅指示液,先以40%氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色,再以(1+1)鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深,可用精密pH試紙測(cè)試,使樣品水解液的pH約為7。然后加20毫升20%乙酸鉛溶液,搖勻,放置10分鐘。再加20毫升10%硫酸鈉溶液,以除去過多的鉛。搖勻后將全部溶液及殘?jiān)D(zhuǎn)入500毫升容量瓶中,用水洗滌錐形瓶,洗液合并于容量瓶中,加水稀釋至刻度。過濾,棄去初濾液20毫升,濾液供測(cè)定用。
B、蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品:按1:1加水在組織搗碎機(jī)中搗成勻漿(蔬菜、水果需先洗凈、晾干、取可食部分)稱取5-10克勻漿(液體樣品可直接量取),于250毫升錐形瓶中,加30毫升乙醚振搖提取(除去樣品中脂肪),用濾紙過濾除去乙醚,再用30毫升乙醚淋洗兩次,棄去乙醚。以下按A自“再用150毫升85%乙醇溶液”起依法操作。
2、測(cè)定:
吸取5.00mL堿性酒石酸銅甲液及5.00mL乙液置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加入兩粒玻璃珠,從滴定管滴加試樣溶液至錐形瓶中,滴加體積比預(yù)測(cè)少1mL,溶液于2min內(nèi)加熱至沸,保持沸騰狀態(tài)繼續(xù)以每?jī)擅胍坏蔚乃俣鹊味ǎ敝了{(lán)色剛好退去為終點(diǎn),記錄樣液消耗體積。同法平行操作三份,得出平均消耗體積。
當(dāng)濃度過低時(shí),則采取直接加入10.00樣品液,免去加水10mL,再用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn),記錄消耗的體積與標(biāo)定時(shí)消耗的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液體積之差相當(dāng)于10mL樣液中所含葡萄糖的量(mg)。
做試劑空白。
還原糖折算成淀粉的換算系數(shù)為0.9。
1、檢測(cè)行業(yè)全覆蓋,滿足不同的檢測(cè);
2、實(shí)驗(yàn)室全覆蓋,就近分配本地化檢測(cè);
3、工程師一對(duì)一服務(wù),讓檢測(cè)更精準(zhǔn);
4、免費(fèi)初檢,初檢不收取檢測(cè)費(fèi)用;
5、自助下單 快遞免費(fèi)上門取樣;
6、周期短,費(fèi)用低,服務(wù)周到;
7、擁有CMA、CNAS、CAL等權(quán)威資質(zhì);
8、檢測(cè)報(bào)告權(quán)威有效、中國(guó)通用;
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