作者:Lance 時間:2022-10-12 來源:互聯(lián)網(wǎng)
菌落總數(shù)的測定方法,看似非常簡單,但由于食品種類繁多,食品中可能存在的微生物菌群較多,要在同等條件下把所有的細(xì)菌培養(yǎng)出來,反應(yīng)樣品的真實情況,實屬不易。
菌總計數(shù)容易會出現(xiàn)哪些問題呢?
1、在營養(yǎng)成分單一、保存條件苛刻的食品(水、水產(chǎn)品等)中,微生物復(fù)蘇、生長緩慢,培養(yǎng)48h計數(shù)時容易遺漏2、一些食品處理后,仍存在類似菌落的顆粒狀雜質(zhì),很難判斷是菌落還是雜質(zhì)3、一些食品容易污染變形桿菌等運動性較強的蔓延菌,培養(yǎng)后無法計數(shù)。關(guān)鍵是,能力驗證是考察實驗室檢驗?zāi)芰Φ耐獠抠|(zhì)量活動,組織方提供試驗樣本,在菌落總數(shù)項目上,一般會考慮增加上述難度。防止蔓延的方法有哪些?
No.1 增加覆蓋一層瓊脂培養(yǎng)基蔓延菌大多為需氧菌,覆蓋一層瓊脂的目的是隔絕空氣,降低需氧菌生長速度。
No.2 添加TTCTTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),不僅可以使菌落產(chǎn)生紅色,便于辨識,也可部分地抑制大片蔓延菌落的形成。
No.3 陶瓦蓋代替平皿蓋用陶瓦蓋代替平皿蓋,可有效去除培養(yǎng)基表面水分,阻止細(xì)菌移動,有效抑制蔓延。傾注培養(yǎng)基凝固后,用陶瓦蓋(干熱滅菌)代替平皿蓋,正置放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
以上三種方法哪種*好呢?
真相大揭秘
方法:我們分別采用PCA直接傾注法、覆蓋一層培養(yǎng)基法、TTC法、用陶瓦蓋代替平皿蓋法對同一樣本進行菌落總數(shù)計數(shù)。其中,TTC培養(yǎng)基冷卻至56℃左右加0.5%的TTC溶液(1mL/100mL)。陶瓦蓋法平皿正置放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。從6小時開始觀察菌落生長情況并計數(shù),以后每隔12小時觀察1次。結(jié) 果PCA直接傾注法菌落生長相對較快,培養(yǎng)24h,菌落數(shù)已達到峰值,其他方法平板培養(yǎng)36h或48h后,達到峰值。添加TTC的平板菌落生長相對比較緩慢,且培養(yǎng)到*后,菌落依然比較小,但總體檢出數(shù)值較高。其原因是TTC平板能將部分細(xì)小菌落,或生長于瓊脂內(nèi)部、顏色與平板顏色相近,肉眼不易觀察的菌落計出。
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