作者:小強 時間:2022-10-13 來源:互聯網
肉類食品三聚氰胺怎么檢測?目前對于肉類食品三聚氰胺有對應的檢測方法標準依據。今天百檢網就給大家介紹一下肉類食品三聚氰胺的測定方法相關信息。
酶聯免疫吸附測定法定量測定三聚氰胺殘留。操作萃取液通過均質及振蕩的方法提取樣品中的三聚氰胺舉辦免疫測定。先將三聚氰胺酶標志物,樣品萃取物及尺度插手到已經包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始回響。在30分鐘的孵育進程中,樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標志物競爭團結微孔中的三聚氰胺抗體,孵育30分鐘后洗掉小孔中全部沒有團結的三聚氰胺及三聚氰胺酶標志物。再用去離子水洗濯竣事后,每孔中插手清亮的底物溶液,團結的酶標志物將無色的底物轉化為藍色的物質。孵育30分鐘后遏制此回響,按照各孔顏色深淺舉辦數據讀取。依據尺度的顏色得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。
必要籌備的原料:
1、蒸餾水或去離子水
2、可汲取50ul和100ul的移液器及吸頭
3、4000轉離心機
4、吸水紙或相等的吸水原料
5、450nm的酶標儀
6、計時器
7、20mMPBS:需自行配制
8、洗濯液:需自行配制
試劑配制:
1、20mMPBS:0.62gNaH2PO4·2H2O+5.73gNa2HPO4·12H2O+9gNaCl,蒸餾水定容至1000ml
2、清洗液:0.62gNaH2PO4·2H2O+5.73gNa2HPO4·12H2O+9gNaCl,蒸餾水定容至1000ml.+0.5ml土溫20
樣品的前處理:肉類(稀釋倍數:5)
1、稱1g肉樣,插手5ml的10%甲醇/20Mmpbs,震蕩2min;
2、4000轉離心5min;
3、取2ml上清液插手2ml異辛烷:氯仿(2:3),混勻;
4、4000轉離心5min,取上層150ul測定。[/b]
檢測方法
1、將全部試劑及樣品回升至室溫20-28℃,但不要安排高出24小時;
2、從鋁箔袋中拿出要求數目的微孔條牢靠在微孔板架上,未行使的孔條與干燥劑一同放入密封袋中生涯;
3、汲取150ul尺度品、樣品到對應微孔中,必需擔保每種溶液行使干凈的吸頭汲取,停止交錯污染。插手
50ul三聚氰胺酶標志物到每個小孔中;
4、輕輕搖板60秒,20-28攝氏度下孵育30分鐘;
5、將微孔中的溶液倒入水槽中,用洗濯液完全布滿微孔,震蕩后倒掉,一再三次,總共四次洗板;
6、*后一次洗濯完后,倒掉孔中溶液,然后翻轉微孔板在吸水紙上拍干;
7、每個微孔中插手100ul底物溶液;
8、20-28攝氏度下,孵育30分鐘;
9、每個微孔中插手100ul遏制液;
10、450nm下讀板。
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