作者:banjian77 時間:2022-10-19 來源:互聯網
事實上,農桿菌介導的植物遺傳轉化有兩個關鍵過程:農桿菌侵染轉化材料及轉化材料的再生。各種因素對于轉化效率的影響都可以歸于對這兩個過程的影響,主要包括以下幾個方面:
農桿菌菌株。農桿菌作為植物基因轉化的工具,其屬性對轉化的成功有決定性的影響。農桿菌依其代謝冠癭堿的種類可分為章魚堿型、農桿堿型、胭脂堿型和琥珀堿型等類型,不同的菌種會影響基因轉化的效果。
外植體類型。外植體類型是轉化的主要影響因素。不同來源和發育狀態的受體都會對農桿菌的侵染產生很大影響。外植體的類型有很多種,如根、莖、芽、子葉、胚胎等,其分生組織細胞完成轉基因后必須能從轉化處理造成的沖擊恢復并快速再生植株,根據試驗目的及意義選擇合適的材料。
培養基組成。培養基組成包括糖含量、鹽濃度、生長調節劑和一些化學物質的加入等,對轉化效率有巨大影響。
篩選標記基因。由于在植物基因轉化中,外源基因穩定的整合頻率低,因此如何選擇適當的篩選標記,以有效地分離轉化與非轉化細胞,且不干擾細胞的正常生長,也不干擾再生植株的產生,是轉化成功的重要環節之一。
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