作者:小強 時間:2022-10-20 來源:互聯網
液體乳中青霉噻唑酸鉀怎么檢測?目前對于液體乳中青霉噻唑酸鉀有對應的檢測方法標準依據。今天百檢網就給大家介紹一下液體乳中青霉噻唑酸鉀的測定方法相關信息。
檢測方法標準依據:DB13/T 1106-2009 液體乳中青霉噻唑酸鉀的測定 高效液相色譜法
1 范圍
本標準規定了液體乳中青霉噻唑酸鉀的高效液相色譜測定方法。
本標準適用于液體乳中青霉噻唑酸鉀的測定。
本標準的方法檢出限:10.0μg/kg。
2 規范性引用文件
下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否使用這些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本適用于本標準。
GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法
3 原理
試樣中的青霉噻唑酸鉀在去除蛋白、脂肪處理后,經高效液相色譜分離,紫外檢測器檢測,外標法定性定量。
4 試劑和材料
除另有說明外,所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682 規定的一級水。
4.1 甲醇:色譜純
4.2 磷酸二氫鈉。
4.3 磷酸二氫鈉溶液(pH=4.5):
4.4 無水乙醇。
4.5 青霉素V鉀標準品:純度≥99‰。
4.6 青霉噻唑酸鉀標準儲備液(1mg加L):準確稱取0.1000g青霉素Ⅴ鉀置于100mL容量瓶中,加入1mL青霉素酶,室溫放置2h后用水定容,搖勻備用。
4.7 青霉素噻唑酸鉀標準冮工作溶液:根據需要吸取適量青霉噻唑酸鉀標準儲備液,用空白樣品稀釋成適當濃度的基質混合標準工作溶液。
5 儀器
5.1 高效液相色譜儀:配有紫外檢測器(UV)。
5.2 分析天平:感量0.1mg和0.01g各一臺。
5.3 低溫高速離心機。
5.4 水相微孔濾膜:0.45μm。
6 測定步驟
6.1 試樣溶液的制備
準確稱取25g(精確到0.01g)牛乳于50mL離心管中,4000r/min低溫(4℃)離心10min;去除上層脂肪層;再加入25mL無水乙醇,20000rmin低溫(4℃)離心10min,取上清液定容至50mL,經0.45μm微孔濾膜過濾,待高效液相色譜分析。
6.2 液相色譜條件
檢測波長:230nm。
色譜柱:ODS C 18 5μm,250mm×2.1mm或相當者。
流動相:磷酸二氫鈉溶液:甲醇=50:50。
流速:1mL/min。
柱溫:30℃。
進樣量:20μL。
6.3 測定
用青霉噻唑酸鉀標準儲備溶液配成的基質標準溶液分別進樣,以標準工作溶液濃度為橫坐標,以峰面積為縱坐標,繪制標準工作曲線。用標準工作曲線對樣品進行定量,樣品溶液中青霉噻唑酸鉀的響應值均應在儀器測定的線性范圍內。
………………
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