食品中黃曲霉毒素M族檢測方法介紹
作者：小強 時間：2022-10-20 來源：互聯網
食品中黃曲霉毒素M族怎么檢測?目前對于食品中黃曲霉毒素M族有對應的檢測方法標準依據。今天百檢網就給大家介紹一下食品中黃曲霉毒素M族的測定方法相關信息。
檢測方法標準依據：GB 5009.24-2016 食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素M族的測定
1.范圍
本標準規定了食品中黃曲霉毒素M1和黃曲霉毒素M2(以下簡稱AFTM1和AFTM2)的測定方法。
**法為同位素稀釋液相色譜-串聯質譜法,適用于乳、乳制品和含乳特殊膳食用食品中AFTM1和AFTM2的測定。
第二法為高效液相色譜法,適用范圍同**法。
第三法為酶聯免疫吸附篩查法,適用于乳、乳制品和含乳特殊膳食用食品中AFTM1的篩査測定。
**法 同位素稀釋液相色譜-串聯質譜法
2.原理
試樣中的黃曲霉毒素M1和黃曲霉毒素M2用甲醇水溶液提取,上清液用水或磷酸鹽緩沖液稀釋后,經免疫親和柱凈化和富集,凈化液濃縮、定容和過濾后經液相色譜分離,串聯質譜檢測,同位素內標法定量。
3.試劑和材料
除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規定的一級水。
3.1 試劑
3.1.1 乙腈(CH3CN):色譜純。
3.1.2 甲醇(CH3OH):色譜純
3.1.3 乙酸銨(CH3 COONH4)。
3.1.4 氯化鈉(NaCl)。
3.1.5 磷酸氫二鈉(Na2HPO4)。
3.1.6 磷酸二氫鉀(KH2PO4)。
3.1.7 氯化鉀(KCl)。
3.1.8 鹽酸(HCl)。
3.1.9 石油醚(CnH2n+2):沸程為30℃～60℃。
3.2 試劑配制
3.2.1 乙酸銨溶液(5mmol/L):稱取0.39g乙酸銨,溶于1000mL水中,混勻。
3.2.2 乙腈-水溶液(25+75):量取250mL乙腈加入750mL水中,混勻。
3.2.3 乙腈-甲醇溶液(50+50):量取500mL乙腈加500mL甲醇中,混勻。
3.2.4 磷酸鹽緩沖溶液(以下簡稱PBS):稱取8.00g氯化鈉、1.20g磷酸氫二鈉(或2.92g十二水磷酸氫二鈉)、0.20g磷酸二氫鉀、0.20g氯化鉀,用900mL水溶解后,用鹽酸調節pH至7.4,再加水至1000mL。
3.3 標準品
3.3.1 AFTM1標準品(C17H12O7,CAS:6795-23-9):純度≥98%,或經國家認證并授予標準物質證書的標準物質。
3.3.2 AFTM2標準品(C17H14O7,CAS:6885-57-0):純度≥98%,或經國家認證并授予標準物質證書的標準物質。
3.3.3 13C17-AFTM1同位素溶液(13C17H14O7):0.5μg/mL。
3.4 標準溶液配制
3.4.1 標準儲備溶液(10μg/mL):分別稱取AFTM1和AFTM2 1mg(精確至0.01mg),分別用乙腈溶解并定容至100mL。將溶液轉移至棕色試劑瓶中,在-20℃下避光密封保存。臨用前進行濃度校準(校準方法參見附錄A)。
3.4.2 混合標準儲備溶液(1.0μg/mL):分別準確吸取10μg/ ML AFT M和AFTM標準儲備液1.00mL于同一10mL容量瓶中,加乙腈稀釋至刻度,得到1.0μg/mL的混合標準液。此溶液密封后避光4℃保存,有效期3個月。
3.4.3 混合標準工作液(100ng/mL):準確吸取混合標準儲備溶液(1.0μg/mL)1.00mL至10mL容量瓶中,乙腈定容。此溶液密封后避光4℃下保存,有效期3個月。
3.4.4 50ng/mL同位素內標工作液1(13C17-AFTM1):取AFTM1同位素內標(0.5μg/mL)1mL,用乙腈稀釋至10mL。在-20℃下保存,供測定液體樣品時使用。有效期3個月。
3.4.5 5ng/mL同位素內標工作液2(13C17-AFTM1):取AFTM1同位素內標(0.5μg/mL)100μL,用乙腈稀釋至10mL。在-20℃下保存,供測定固體樣品時使用。有效期3個月。
3.4.6 標準系列工作溶液:分別準確吸取標準工作液5μL、10μL、50μL、100μL、200μL、500μL至10mL容量瓶中,加入100μL50ng/mL的同位素內標工作液,用初始流動相定容至刻度,配制AFTM1和AFTM2的濃度均為0.05ng/mL、0.1ng/mL、0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL的系列標準溶液。
4.儀器和設備
4.1 天平:感量0.01g、0.001g和0.00001g。
4.2 水浴鍋:溫控50℃±2℃。
4.3 渦旋混合器。
4.4 超聲波清洗器。
4.5 離心機:≥6000r/min。
4.6 旋轉蒸發儀。
4.7 固相萃取裝置(帶真空泵)。
4.8 氮吹儀。
4.9 液相色譜-串聯質譜儀:帶電噴霧離子源。
4.10 圓孔篩:1mm～2mm孔徑。
4.11 玻璃纖維濾紙:快速,高載量,液體中顆粒保留1.6μm。
4.12 一次性微孔濾頭:帶0.22μm微孔濾膜(所選用濾膜應采用標準溶液檢驗確認無吸附現象,方可使用)。
………………
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