食品微生物檢測(cè)項(xiàng)目 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌測(cè)定方法
作者：小強(qiáng) 時(shí)間：2022-10-20 來(lái)源：互聯(lián)網(wǎng)
食品小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌怎么檢測(cè)?目前對(duì)于食品小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌有對(duì)應(yīng)的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。今天百檢網(wǎng)就給大家介紹一下食品小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的測(cè)定方法相關(guān)信息。
檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)：GB 4789.8-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)
1.范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌( Yersinia enterocolitica)的檢驗(yàn)方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的檢驗(yàn)。
2.設(shè)備和材料
除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下：
2.1 冰箱:0℃～4℃
2.2 恒溫培養(yǎng)箱:26℃±1℃、36℃±1℃。
2.3 顯微鏡:10倍～100倍。
2.4 均質(zhì)器。
2.5 天平:感量0.1g。
2.6 滅菌試管:16mm×160mm、15mm×100mm。
2.7 滅菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)。
2.8 錐形瓶:200mL、500mL
2.9 滅菌平皿:直徑90mm。
2.10 微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統(tǒng)。
3.培養(yǎng)基和試劑
3.1 改良磷酸鹽緩沖液:見(jiàn)A.1。
3.2 CIN-1培養(yǎng)基( Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar):見(jiàn)A.2。
3.3 改良Y培養(yǎng)基( Agar Y, Modified):見(jiàn)A.3。
3.4 改良克氏雙糖培養(yǎng)基:見(jiàn)A.4。
3.5 糖發(fā)酵管:見(jiàn)A.5。
3.6 鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基:見(jiàn)A.6。
3.7 半固體瓊脂:見(jiàn)A.7。
3.8 緩沖葡萄糖蛋白胨水[甲基紅(MR)和VP試驗(yàn)用]:見(jiàn)A.8。
3.9 堿處理液:見(jiàn)A.9。
3.10 尿素培養(yǎng)基:見(jiàn)A.10。
3.11 營(yíng)養(yǎng)瓊脂:見(jiàn)A.11。
3.12 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌診斷血清。
4.檢驗(yàn)程序
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)程序見(jiàn)圖1
5.操作步驟
5.1 增菌
以無(wú)菌操作取25g(或25mL)樣品放人含有225mL改良磷酸鹽緩沖液增菌液的無(wú)菌均質(zhì)杯或均質(zhì)袋內(nèi),以8000r/min均質(zhì)lmin或拍擊式均質(zhì)器均質(zhì)1min。液體樣品或粉末狀樣品,應(yīng)振蕩混勻均質(zhì)后于26℃±1℃增菌48h～η2h。增菌時(shí)間長(zhǎng)短可根據(jù)對(duì)樣品污染程度的估計(jì)來(lái)確定。
5.2 堿處理
除乳與乳制品外,其他食品的增菌液0.5mL與堿處理液4.5mL充分混合15s。
5.3 分離
將乳與乳制品增菌液或經(jīng)過(guò)堿處理的其他食品増菌液分別接種于CIN-Ⅰ瓊脂平板和改良Y瓊脂平板,26℃士1℃培養(yǎng)48h±2h。典型菌落在CIN-1上為深紅色中心,周圍具有無(wú)色透明圈(紅色牛眼狀菌落),菌落大小為Ⅰmm～2mm,在改良Y瓊脂平板上為無(wú)色透明、不黏稠的菌落。
5.4 改良克氏雙糖試驗(yàn)
分別挑取5.3中的可疑菌落3個(gè)～5個(gè),分別接種于改良克氏雙糖鐵瓊脂,接種時(shí)先在斜面劃線,再于底層穿刺,26℃±1℃培養(yǎng)24h,將斜面和底部皆變黃且不產(chǎn)氣的培養(yǎng)物做進(jìn)一步的生化鑒定。
………………
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