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染色體檢測,小鼠微核試驗實驗報告

作者:Lance 時間:2022-10-24 來源:互聯網

微核試驗的方法:

1. 動物體內細胞微核:主要有骨髓嗜多染紅細胞微核試驗;外周血淋巴細胞微核試驗。

2. 細胞培養微核試驗;

3. 蠶豆根尖微核試驗:實驗所用的蠶豆為松滋青皮豆,通過浸種、催芽、染毒、恢復培養、固定、孚爾根染色等步驟后,進行鏡檢。


微核試驗是檢測染色體或有絲分裂器損傷的一種遺傳毒性試驗方法。無著絲粒的染色體片段或因紡錘體受損而丟失的整個染色體,在細胞分裂后期仍留在子細胞的胞質內成為微核。*常用的是嚙齒類動物骨髓嗜多染紅細胞(PCE)微核試驗。以受試物處理嚙齒類動物,然后處死,取骨髓,制片、固定、染色,于顯微鏡下計數PCE中的微核。如果與對照組比較,處理組PCE微核率有統計學意義的增加,并有劑量-反應關系,則可認為該受試物是哺乳動物體細胞的致突變物。人外周淋巴細胞微核試驗,可用于接觸環境致突變物的人群的監測和危險性評價。

用微核試驗來評價藥物、放射線、有毒物質等對人體細胞或體外培養細胞遺傳學損傷仍是一個直觀有效可行的方法,在遺傳毒理、醫學、食品、藥物、環境等諸多方面得到了廣泛的應用。微核計數經濟,迅速,簡便,不需要特殊技能,可以統計更多的細胞并實現計算機自動計數。若采用核型穩定的細胞,確立統一的操作協議,進行實驗室間的合作建立數據庫,應用探針技術的微核試驗很可能被納入遺傳毒理學試驗。微核試驗技術的種類很多,包括常規微核試驗、細胞分裂阻滯微核分析法、熒光原位雜交試驗與DNA探針與抗著絲粒抗體染色等方法。

在化學物質中,有很多能引起染色體的異常。染色體是遺傳物質的載體并含有生物體全部的遺傳信息,染色體遺傳信息的異常可不同程度地影響生物機體的生存。輕者突變,重者死亡。同樣,對人類就會引起各種疾病和損害。對腫瘤細胞的詳細研究表明,大多數腫瘤細胞都存在染色體異常。此外,先天性染色體異常可引起多種遺傳性疾病。如:21號染色體三體就可引起唐納氏綜合征(先天愚 型),而5號染色體短臂部分缺失(5P一)引起貓叫綜合征。因此,染色體僅出現微小的異常變化,都可能對人體健康產生非常嚴重的影響。

化學物質能否誘發染色體異常?有許多種評價方法。但*常用的是:直接觀察染色體異常(染色體中期相分析,chromosomal analysis,簡稱cA)和檢測由于染色體丟失或斷片形成而出現的微核(微核試驗,mieronucleus test,簡稱MNT)。MNT是公認的檢測染色體異常的簡便方法。特別是應用小鼠骨髓紅細胞微核(micronuclei,簡稱MN)檢測方法,已成為一種能獲得大量客觀數據的化學物質遺傳毒性評價體系。

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