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激光掃描共聚焦顯微鏡,檢測第三方服務中心

作者:Lance 時間:2022-11-09 來源:互聯網

激光掃描共聚焦顯微鏡檢測機構是怎么檢測產品的?做激光掃描共聚焦顯微鏡檢測就上百檢網。

激光掃描共聚焦顯微鏡系統主要包括掃描模塊、激光光源、熒光顯微鏡、數字信號處理器、計算機以及圖像輸出設備等。

(1) 掃描模塊

掃描模塊主要由針孔光欄(控制光學切片的厚度)、分光鏡(按波長改變光線傳播方向)、發射熒光分色器(選擇一定波長范圍的光進行檢測)、檢測器(光電倍增管)組成。熒光樣品中的混合熒光進入掃描器,經過檢測針孔光欄、分光鏡和分色器選擇后,被分成各單色熒光,分別在不同的熒光通道進行檢測并形成相應的共焦圖象,同時在計算機屏幕上可以顯示幾個并列的單色熒光圖象及其合成圖象。

(2) 熒光顯微鏡系統

顯微鏡是LSCM的主要組件,它關系到系統的成像質量。顯微鏡光路以無限遠光學系統可方便地在其中插人光學選件而不影響成像質量和測量精度。物鏡應選取大數值孔徑平場復消色差物鏡,有利于熒光的采集和成像的清晰。物鏡組的轉換,濾色片組的選取,載物臺的移動調節,焦平面的記憶鎖定都應由計算機自動控制。

激光掃描共聚焦顯微鏡所用的熒光顯微鏡大體與常規熒光顯微鏡相同,但又有其特點:需與掃描器連接,使激光能進入顯微鏡物鏡照射樣品,并使樣品發射的熒光到達檢測器;需有光路轉換裝置,即汞燈與激光轉換,同時汞燈光線強度可調。

(3) 常用激光器

激光掃描共聚焦顯微鏡使用的激光光源有單激光和多激光系統,常用的激光器包括以下三種類型:

半導體激光器:405nm(近紫外譜線)

氬離子激光器:457nm、477nm、488nm、514nm(藍綠光)

氦氖激光器:543nm(綠光-氦氖綠激光器)633nm (紅光—氦氖紅激光器)

UV激光器(紫外激光器):351 nm、364 nm(紫外光)

(4)輔助設備

風冷、水冷冷卻系統及穩壓電源。

激光掃描共聚焦顯微鏡的基本工作原理是**由激光器發射的一定波長的激發光,光線經放大后通過掃描器內的照明針孔光欄形成點光源,由物鏡聚焦于樣品的焦平面上,樣品上相應的被照射點受激發而發射出的熒光,通過檢測孔光欄后,到達檢測器,并成像于計算機監視屏上。這樣由焦平面上樣品的的每一點的熒光圖像組成了一幅完整的共焦圖像,稱為光切片。

激光掃描共聚焦熒光顯微鏡相對普通熒光顯微鏡的優點

(1) LSCM的圖象是以電信號的形式記錄下來的,所以可以采用各種模擬的和數字的電子技術進行圖象處理;

(2) LSCM利用共聚焦系統有效的排除了焦點以外的光信號干擾,提高了分辨率,顯著改善了視野的廣度和深度,使無損傷的光學切片成為可能,達到了三維空間定位;

(3) 由于LSCM能隨時采集和記錄檢測信號,為生命科學開拓了一條觀察活細胞結構及特定分子、離子生物學變化的新途徑;

(4) LSCM除具有成像功能外,還有圖象處理功能和細胞生物學功能,前者包括光學切片、三維圖象重建、細胞物理和生物學測定、熒光定量、定位分析以及離子的實時定量測定;后者包括黏附細胞的分選、激光細胞纖維外科及光陷阱技術、熒光漂白后恢復技術等。

樣品要求

1,樣品經熒光探針標記;

2,固定的或活的組織;

3,固定的或活的貼壁培養細胞應培養在Confocal專用小培養皿或蓋玻片上;

4,懸浮細胞,甩片或滴片后,用蓋玻片封片;

5,載玻片厚度應在0.8~1.2mm之間,蓋玻片應光潔,厚度在0.17mm左右

6,標本不能太厚,如太厚激發光大部分消耗在標本下部,而物鏡直接觀察到的上部不能充分激發;

7,盡量去除非特異性熒光信號;

8,封片劑多用甘油:PBS混合液(9:1)

檢測儀器

特別提示:點擊下方儀器圖片,可進行檢測預約使用

激光共聚焦顯微鏡

激光共聚焦超高分辨顯微鏡
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