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高效液相色譜法測定肉食品中常見4種抗生素殘留

作者:百檢 時間:2022-11-28 來源:互聯網

檢測及試驗方法

  儀器與試劑

  南京科捷:LC-10Tvp高壓恒流泵,SPD-10Tvp紫外檢測器

  超聲波清洗儀       反相色譜柱C18

  固相萃取柱      泰樂菌素、替米考星、氯霉素、氟苯尼考標準品均為天津市科密歐化學試劑開發中心監制

  乙腈、正己烷均為優級純

  其它試劑均為分析純

  實驗用水均為二次蒸餾水

  新鮮牛肉與雞肉均為超市所購

  樣品處理

  將新鮮牛肉及雞肉分別勻漿后,于-18℃冰箱中保存。測定時,將勻漿冷凍保存的牛肉與雞肉樣品于室溫下自然解凍。分別準確稱取20.0g樣品置于50mL具塞錐形瓶中,加入20mL乙腈,超聲10min,轉移至離心管,以5000r/min離心10min,收集上清液,離心沉淀物用上述方法重復提取2次,合并上清液。向得到的清夜中加入30mL正己烷,用力振蕩5min,靜置分層,棄去上層正己烷層。然后將溶液于40℃減壓旋轉蒸發至約2mL,氮氣吹干后加入5mL甲醇一磷酸鹽混合液超聲溶解抗生素,*好定容至10mL。樣品凈化

  將HLB固相萃取小柱用5mL甲醇、5mL去離子水活化后,將4得到的樣品處理液上固相萃取柱(柱流速保持1滴/s),用10mL蒸餾水、10mL5%甲醇水溶液淋洗固相萃取柱,再用10mL甲醇洗脫,將洗脫液用氮氣吹干后,加入流動相超聲定容至5mL,*后,經0.22um濾膜過濾后進樣。

        方法的準確度、精密度、線性范圍、回收率

  對于牛肉樣品分別添加0.1、0.5、1.0mg/kg 3個水平的混合標準溶液,按照4與5樣品處理及凈化方法,每個水平平行測定4次,進行回收率實驗,并且以3倍信噪比分別計算泰樂菌素、替米考星、氯霉素、氟苯尼考在牛肉樣品中的檢出限,在測定條件下4種藥物在0.1—20mg/L范圍內均呈線性,線性方程與相關系數、平均回收率、相對標準偏差。

  實際樣品檢測

  本實驗分別對10份牛肉樣品和10份雞肉樣品中泰樂菌素、替米考星、氯霉素、氟苯尼考進行檢測,沒有發現牛肉樣品中含有以上抗生素,但是在4份雞肉樣品中都不同程度檢測到了泰樂菌素,*高為200ug/kg,*低為80ug/kg,平均含量為120ug/kg,高于我國動物性食品中獸藥*高殘留限量標準(100ug/kg)。

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