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BTK抑制劑(Ibrutinib-biotin)檢測

作者:荀彧 時間:2022-12-06 來源:互聯(lián)網(wǎng)

操作規(guī)程:

1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)

中文名稱:BTK抑制劑(Ibrutinib-biotin)

英文名稱:Ibrutinib-biotin

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期:1~3天

Ibrutinib-biotin是一種由Ibrutinib通過長鏈接頭連接到生物素上組成的探針,具體可參考WO2014059368A1中Compound1-5,抑制BTK,IC50值為0.755-1.02nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

CAS號:1599432-18-4

純度:99.67%

分子量:1097.37

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

注意事項:

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、*好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。*好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

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BTK抑制劑(Ibrutinib-biotin)N-硝基-L-精甲酯

其他N'-硝基-L-精甲酯鹽鹽;NG-硝基-L-精甲酯鹽鹽;NG-硝基-L-精甲基酯鹽鹽

英文名稱:L-NAME

其他英文名稱:N'-Nitro-L-arginine-methyl ester hydrochloride;H-Arg(NO2)-Ome•HCl;Nω-Nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%

包裝:1克/5克/25克

CAS號:51298-62-5

C7H15N5O4•HC1=269.7

級別:BR

含量:≥98.0%

熔點:153~162℃

比旋光度:+13~+17.0°(C=1 in MeOH)

性狀:粉末,溶于甲

用途:生化研究。一種抑制NO生產(chǎn)的精類似物。在對血管系統(tǒng)多重的效果。抑制乙酰膽堿誘發(fā)的舒張,誘導(dǎo)增加動脈血液壓力

保存:-20℃


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