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ATR抑制劑(VE-822)檢測

作者：荀彧時間：2022-12-06 來源：互聯(lián)網(wǎng)

產(chǎn)品屬于：

中文名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	發(fā)貨周期
ATR抑制劑(VE-822)	VE-822	1mL(10mM)\|5mg\|10mg\|50mg\|100mg\|200mg	1～3天

商品介紹：

英文名稱：VE-822

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

VE-822是一種ATR抑制劑，Ki值<0.2nM，也抑制ATM，Ki為34nM。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

CAS號：1232416-25-9

別名：VX-970

純度：99.22%

分子量：463.55

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

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交鏈孢屬叉頭蛋白P3抗體Human EMCN (Endomucin) ELISA KIT牛胰高血糖樣肽1(GLP-1)免疫試劑盒

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枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)羊藿

溫哥華假單胞菌Pseudomonas│vancouverensis 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)異戊二烯

土曲霉Aspergillus│terreus Thom 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)異皮啶
ATR抑制劑(VE-822)氯化膽堿

其他氯化膽脂；增蛋

英文名稱： Choline chloride

其他英文名稱： (2-Hydroxyethyl) trimethylammonium chloride

產(chǎn)品規(guī)格： AR，98%

包裝：100克/500克

CAS號：67-48-1

C5H14Cl****39.62

級別：AR

含量（以氮計(jì)）：98.0～101.0%

含量（以氯計(jì)）：98.0～101.0%

基胺：合格

水溶解試驗(yàn)：合格

重金屬：≤0.002%

灼燒殘?jiān)骸?.05%

性狀：結(jié)晶。微有魚腥臭。味咸苦。易潮解。在堿液中不穩(wěn)定。易溶于水和乙，不溶于和二硫化碳，水溶液幾乎呈中性。熔點(diǎn)240℃(分解)。低毒，半數(shù)致死量(大鼠，經(jīng)口)3400mg/kg。有刺激性

用途：生化研究。培養(yǎng)基配制。

保存：RT

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，*后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，*后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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