2007年，歐洲藥品管理局(European Medicines Agency，EMA)發(fā)現(xiàn)部分批次的抗艾滋病藥物Viracept（nelfinavir mesylate），即奈非那韋甲磺酸鹽中含有高劑量的基因毒性雜質(zhì)甲磺酸乙酯(ethyl methanesulfonate; EMS)，遂決定召回。

2018年，先后在兩款纈沙坦制劑中檢出含有基因毒性雜質(zhì)N,N- 二甲基亞硝胺（NDMA），這使得對(duì)基因毒性控制的要求提高，相關(guān)法規(guī)內(nèi)容也在逐步提升。

什么是基因毒性雜質(zhì)？

基因毒性雜質(zhì)，也稱遺傳毒性雜質(zhì)，通常是指能夠引起DNA突變、染色體撕裂或者DNA重組的物質(zhì)。其對(duì)DNA 的損害作用包括染色體斷裂、DNA 重組及復(fù)制過程中共價(jià)鍵的插入和修飾，也包括在細(xì)胞水平上產(chǎn)生基因毒性物質(zhì)而產(chǎn)生的突變。

從2000年到2006年EMA研究如何制定一個(gè)安全的閾值；2014年ICHM7歷史18個(gè)月頒布，2017年再次更新QSAR和毒理學(xué)關(guān)注閾值評(píng)估；2018年NMPA更新《藥物遺傳毒性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，藥典委也根據(jù)ICHM7在修訂指導(dǎo)原則。

基于雜質(zhì)對(duì)藥品質(zhì)量有著顯著影響，無論進(jìn)行任何藥品注冊(cè)申報(bào)都對(duì)雜質(zhì)分析和控制有相應(yīng)的法規(guī)要求，目的是確保藥品的功效、質(zhì)量與安全。

對(duì)于目前公認(rèn)為的具有基因毒性警示結(jié)構(gòu)或已知致癌性的化合物，如磺酸酯類、鹵代烷烴類、黃曲霉素、N-亞硝基化合物、偶氮氧化物等，應(yīng)進(jìn)行研究并定入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行控制。

研究基因毒性雜質(zhì)的難點(diǎn)在哪里？

基因毒性雜質(zhì)的研究，是一件富有挑戰(zhàn)性的工作，它涉及到工藝化學(xué)、毒理學(xué)數(shù)據(jù)采集和處理評(píng)估以及化學(xué)分析方法的建立和使用，需要多領(lǐng)域?qū)＜业墓餐Α?/span>

1.工藝評(píng)估難點(diǎn)

基因毒性雜質(zhì)的來源主要為原料藥合成過程中的起始物料、試劑、中間體、催化劑和反應(yīng)副產(chǎn)物等，此外，藥物在合成、儲(chǔ)存或者制劑過程中也可能因降解而產(chǎn)生基因毒性雜質(zhì)，是一個(gè)*其復(fù)雜的過程問題。

對(duì)潛在遺傳毒性雜質(zhì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的策略就是利用質(zhì)量源于設(shè)計(jì)(quality by design，QbD) 提供更詳盡的對(duì)工藝和分析的理解，*終確定雜質(zhì)產(chǎn)生的臨界區(qū)域。

2.初步毒理難點(diǎn)

完成工藝評(píng)估后，從無到有找到這些可能的基因毒性雜質(zhì)，要如何確定這些基因毒性雜質(zhì)的毒性情況，需要控制在何種限度呢？需要通過專業(yè)的數(shù)據(jù)文獻(xiàn)以及計(jì)算機(jī)模擬系統(tǒng)*終定出安全閾值，如何判定安全閾值是準(zhǔn)確的，則需通過風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)管理進(jìn)行反復(fù)校準(zhǔn)。

參考法規(guī)中的警示機(jī)構(gòu)，結(jié)合數(shù)據(jù)庫與生物學(xué)信息，雜質(zhì)按照五類法分類，根據(jù)分類建立不同的雜質(zhì)認(rèn)證策略。對(duì)于藥品中潛在的基因毒性雜質(zhì)，建立基于每日允許攝入量（AI）和TTC概念的允許指標(biāo)限量。

3.分析難點(diǎn)

基因毒性雜質(zhì)能改變?nèi)梭wDNA，自身反應(yīng)性強(qiáng)，對(duì)其控制限度比較低，基質(zhì)干擾大，對(duì)儀器的靈敏度高，如何保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性也成了分析時(shí)需要解決的問題。

總結(jié)：

全面參與基因毒性雜質(zhì)研究的質(zhì)量控制，需要做到充分工藝評(píng)估，專業(yè)毒理評(píng)估和精準(zhǔn)分析技術(shù)。作為基因毒性雜質(zhì)研究領(lǐng)域?qū)I(yè)的研究型第三方服務(wù)平臺(tái)，百檢網(wǎng)醫(yī)藥可以做到什么？

我們從2012年開始從事藥學(xué)研究，人員規(guī)模達(dá)200余人，擁有超3000平方米實(shí)驗(yàn)室，精密儀器累計(jì)200多臺(tái)，包含Q-TOF、LCMS-MS以及GCMS等。院士專家工作站以及CMA和CNAS資質(zhì)認(rèn)證。

在基因毒性化合物研究方面，我們研究了幾百種基因毒性雜質(zhì)化合物，涵蓋了多個(gè)類別，包含N-亞硝基取代物、烷基或苯基磺酸酯、鹵代烷類、有機(jī)胺類、硝基取代芳香化合物、氨基甲酸酯、酰氯等。

我們結(jié)合ICH的要求，1）通過符合ICHM7指導(dǎo)原則的軟件進(jìn)行基因毒性預(yù)測；2）檢索已有基因毒性雜質(zhì)數(shù)據(jù)庫；3）根據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)制定合理的限度。

由于基因毒性雜質(zhì)的檢測限度非常低，我們配備有多臺(tái)高靈敏度的分析儀器，已提供檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度。

我們也是根據(jù)不同的業(yè)務(wù)需求，實(shí)行GMP和ISO雙質(zhì)量運(yùn)行體系，以及符合CFR21的數(shù)據(jù)完整性要求的OpenLabCDS和Empower3，并擁有全球企業(yè)級(jí)數(shù)據(jù)管理領(lǐng)域的***華睿泰的數(shù)據(jù)備份軟件VERITAS，保障數(shù)據(jù)的永久保存。還有賽默飛的實(shí)驗(yàn)室整體自動(dòng)化的管理軟件SampleManager LIMS? 軟件，實(shí)現(xiàn)全過程監(jiān)控。

從2012年累計(jì)至今的千余個(gè)數(shù)據(jù)庫，可實(shí)現(xiàn)1000多個(gè)項(xiàng)目的運(yùn)行通量，我們也希望和委托方有更好的互動(dòng)，所以按照項(xiàng)目計(jì)劃實(shí)行直接技術(shù)對(duì)接的方式，進(jìn)行周期性匯報(bào)，幫助委托方提前布局項(xiàng)目，保障及時(shí)交付和申報(bào)。



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