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糜蛋白酶成分檢測

作者:百檢網(wǎng) 時(shí)間:2021-09-15 來源:互聯(lián)網(wǎng)

性狀:本品為白色或者類白色結(jié)晶性粉末。
檢驗(yàn):酸度取本品,加水制成每一1ml中含2mg的溶液,依法測定(附錄ⅥH)
,pH值應(yīng)為5.5~7.0。
溶液的廓清度取本品,加水制成每一1ml中含2mg的溶液,溶液應(yīng)廓清。
胰卵白酶取本品,加水制成每一1ml中含10mg的溶液,作為供試品溶液;吸收供試
品溶液50μl與0.1%胰卵白酶比照品溶液5μl,劃分置白色點(diǎn)滴板上,各加對甲苯磺酰
-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽試液0.2ml,安排后,供試品溶液應(yīng)不顯現(xiàn)紫赤色或者呈色時(shí)間晚
于胰卵白酶比照品溶液(1%)。
干燥失重取本品約0.2g,以五氧化二磷為干燥劑,在60℃減壓干燥4小時(shí),減失
重量不患上過5.0%(附錄ⅧL)。
熾灼殘?jiān)换忌线^2.5%(附錄ⅧN)。
種別:卵白分化酶。
效價(jià)測定:底物溶液的制備?。?乙酰-L-酪氨酸乙酯23.7mg,置100ml量瓶
中,加磷酸鹽緩沖液(取0.067mol/L磷酸二氫鉀溶液38.9ml與0.067mol/L磷酸氫二鈉溶
液61.1ml,夾雜,pH值為7.0)50ml,溫?zé)崾瓜?,冷卻后再濃縮至刻度,搖勻。冰凍
保留,但不患上頻頻凍融。
供試品溶液的制備細(xì)密稱取本品適量,用0.0012mol/L鹽酸溶液制成每一1ml中含12
~16糜卵白酶單元的溶液。
測定法取0.0012mol/L鹽酸溶液0.2ml與底物溶液3.0ml,照分光光度法(附錄ⅣA)
測定,在25℃±0.5℃,于237nm的波利益測定并調(diào)理吸取度為0.200。再取供試品溶液0.2
ml與底物溶液3.0ml,當(dāng)即記時(shí)并搖勻,每一隔30秒鐘讀取吸取度,共5分鐘(重復(fù)一次),吸
收度的變革率應(yīng)恒定,恒按時(shí)間不患上少于3分鐘。若變革率不克不及連結(jié)恒定,可用較低濃度
另行測定。每一30秒鐘的吸取度變革率應(yīng)節(jié)制在0.008~0.012,以吸取度為縱坐標(biāo),時(shí)間為
橫坐標(biāo),作圖,取在3分鐘內(nèi)呈直線的部門,按下式計(jì)較。
A2-A1
P=──────────
0.0075TW
式中P為每一1mg糜卵白酶的效價(jià),單元;
A2為直線上起頭的吸取度;
A1為直線上終止的吸取度;
T為A2至A1讀數(shù)的時(shí)間,分;
W為測定液中含供試品的量,mg;
0.0075為在上述前提下,吸取度每一分鐘扭轉(zhuǎn)0.0075,即至關(guān)于1個(gè)糜卵白酶
單元。
判別:取本品,加水制成每一1ml中約含1mg的溶液,取0.05ml置白色點(diǎn)滴板上,
加N-乙酰-L-酪氨酸乙酯試液0.2ml,混勻后,顯紫赤色。
------百檢網(wǎng)成分檢測

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