作者:百檢網 時間:2021-10-26 來源:互聯網
顯微鑒別是利用顯微技術對中藥進行特征分析,以確定其品種和質量的一種鑒定方法。顯微鑒定主要包括組織鑒定和粉末鑒定。組織鑒定是通過觀察藥材的切片或磨片鑒別其組織構造特征,適合于完整的藥材或粉末特征相似的同屬藥材的鑒別;
粉末鑒定是通過觀察藥材的粉末制片或解離片鑒別其細胞分子及內含物的特征,適合于破碎、粉末狀藥材或中成藥的鑒別。進行顯微鑒定時,由于鑒定材料的不同(完整、破碎、粉末)和藥用種類及藥用部位的不同,選擇顯微鑒定的方法也不同。
1.顯微制片方法
(1)橫切或縱切片
(2)解離組織片:如需觀察細胞的完整形態,尤其是纖維、導管、管胞、石細胞等細胞彼此不易分離的組織,需利用化學試劑使組織中各細胞之間的細胞間質溶解,使細胞分離。如樣品中薄壁組織占大部分,木化組織少或分散存在的,可用氫氧化鉀法;如樣品堅硬,木化組織較多或集成群束的,可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。
(3)表面制片:鑒定葉、花、果實、種子、全草等類藥材,可取葉片、萼片、花冠、果皮、種皮制成表面片,加適宜試液,觀察各部位的表皮特征。
(4)粉末制片:粉末狀藥材可選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其他適當試液處理后觀察。為了使細胞、組織能觀察清楚,需用水合氯醛液裝片透化。其透化的目的是溶解淀粉粒、蛋白質、葉綠體、樹脂、揮發油等,并使已收縮的細胞膨脹。
透化方法為,取粉末少許,置載玻片上,滴加水合氯醛液適量,在小火焰上微微加熱透化,加熱時必須續加水合氯醛液至透化清晰為度。為避免放冷后析出水合氯醛結晶,可在透化后滴加稀甘油少許,再加蓋玻片。
(5)花粉粒與孢子制片
(6)磨片制片:堅硬的礦物藥、動物藥,可采用磨片法制片。
(7)含飲片粉末的中成藥顯微制片
2.細胞內含物鑒定和細胞壁性質檢査
(1)細胞內含物鑒定
①淀粉粒:加碘試液,顯藍色或紫色;用醋酸甘油試液裝片,置偏光顯微鏡觀察,未糊化淀粉粒有偏光現象;已糊化的無偏光現象。
②糊粉粒:加碘試液,顯棕色或黃棕色;加硝酸汞試液顯磚紅色。
③脂肪油、揮發油或樹脂:加蘇丹Ⅲ試液呈橘紅色、紅色或紫紅色;加90%乙醇,脂肪油不溶解,揮發油則溶解。
④菊糖:加10%α-萘酚乙醇溶液,再加硫酸,呈紫紅色并很快溶解。
⑤黏液:加釕紅試液,顯紅色。
⑥草酸鈣結晶:加稀醋酸不溶解,加稀鹽酸溶解而無氣泡產生;加硫酸溶液(1→2),逐漸溶解,片刻后析出針狀硫酸鈣結晶。
⑦碳酸鈣結晶(鐘乳體):加稀鹽酸溶解,同時有氣泡產生。
⑧硅質:加硫酸不溶解。
(2)細胞壁性質檢查
①木質化細胞壁:加間苯三酚試液1~2滴,稍放置,加鹽酸1滴,因木化程度不同,顯紅色或紫紅色。
②木栓化或角質化細胞壁:加蘇丹Ⅲ試液,稍放置或微熱,呈橘紅色至紅色。
③纖維素細胞壁:加氯化鋅碘試液,或先加碘試液潤濕后,稍放置,再加硫酸溶液(33→50)顯藍色或紫色。
④硅質化細胞壁:加硫酸無變化。
3.顯微測量
觀察細胞和后含物時,常需要測量其直徑、長短(以微米計算),作為鑒定依據之一。測量可用目鏡測微尺進行。
4.偏光鏡的應用
偏光顯微鏡主要用于觀察和分析礦物類中藥的光學性質,用于鑒定礦物類中藥。
對于透明礦物,一般使用透射光源的偏光顯微鏡,對于不透明礦物則使用反射光源的偏光顯微鏡。
亦可用于研究動物、植物類中藥的組織及細胞內含物,如淀粉粒、草酸鈣簇晶等。
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