1.范圍

本標準規(guī)定了食品中對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯的氣相色譜方法。

本標準適用于醬油、醋、飲料及果醬中對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯的測定。

2.原理

試樣酸化后,對羥基苯甲酸酯類用乙醚提取,濃縮近干用乙醇復溶,并利用氫火焰離子化檢測器氣相色譜法進行分離測定,保留時間定性,外標法定量。

3.試劑和材料

除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的二級水。

3.1 試劑

3.1.1 無水乙醚(C2H5OC2H5):重蒸。

3.1.2 無水乙醇(C2H5OH):優(yōu)級純。

3.1.3 鹽酸(HCl)。

3.1.4 氯化鈉(NaCl)。

3.1.5 無水硫酸鈉(Na2SO4)。

3.1.6 碳酸氫鈉( NaHCO3)。

3.2 試劑配制

3.2.1 飽和氯化鈉溶液:稱取40g氯化鈉(3.1.4)加100mL水充分攪拌溶解。

3.2.2 碳酸氫鈉溶液(10g/L):稱取1g碳酸氫鈉(3.1.6),溶于水并稀釋至100mL。

3.2.3 鹽酸溶液(1:1):量取50mL鹽酸(3.1.3),用水稀釋至100mL。

3.3 標準品

3.3.1 對羥基苯甲酸甲酯(C8H8O3),純度≥99.8%。

3.3.2 對羥基苯甲酸乙酯(C3H10O3),純度≥99.7%。

3.3.3 對羥基苯甲酸丙酯(C10H12O3),純度≥99.3%。

3.3.4 對羥基苯甲酸丁酯(C11H14O3),純度≥99.7%。

3.4 標準溶液配制

3.4.1 單個對羥基苯甲酸酯類標準儲備液(l.00omg/mL):準確稱取對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸丙酯標準物質(zhì)各0.0500g于50.0mL容量瓶中,用無水乙醇溶解并定容至刻度,置4℃左右冰箱保存,可保存1個月。

3.4.2 對羥基苯甲酸酯類標準中間液(100μg/mL):分別準確吸取單個對羥基苯甲酸酯類標準儲備液(3.4.1)1.0mL于10.0mL容量瓶中,用無水乙醇稀釋至刻度,搖勻。臨用時配制。

3.4.3 對羥基苯甲酸酯類標準工作液1～5:分別吸取對羥基苯甲酸酯類標準中間液(3.4.2)0.40mL、1.0m、2.0mL、5.0mL、10.0mL于10.0mL容量瓶中,用無水乙醇稀釋并定容。此即為4.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100μg/mL的標準工作液1～5的濃度,臨用時配制。

3.4.4 對羥基苯甲酸酯類標準工作液6和標準工作液7(200μg/mL、300μg/mL):分別吸取對羥基苯甲酸酯類標準儲備液(3.4.1)2.0mL、3.0mL于10.0mL容量瓶中,用無水乙醇稀釋至刻度,搖勻。臨用時配制。

4.儀器與設備

4.1 氣相色譜儀:配有氫火焰離子化檢測器(FID)。

4.2 天平:感量0.1mg和1mg。

4.3 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

4.4 渦旋混勻器。

5.分析步驟

5.1試樣制備

5.1.1 試樣處理

5.1.1.1 醬油、醋、飲料:一般液體試樣搖勻后可直接取樣。稱取5g(精確至0.001g)試樣于小燒杯中,并轉(zhuǎn)移至125mL分液漏斗中,用10mL飽和氯化鈉溶液分次洗滌小燒杯,合并洗滌液于125mL分液漏斗,加廴1mL1:1鹽酸酸化,搖勺,分別以75mL、50mL、50mL無水乙醚提取三次,每次2min,放置片刻,棄去水層,合并乙醚層于250mL分液漏斗中,加入10mL飽和氯化鈉溶液洗滌一次,再分別以碳酸氫鈉溶液30mL、30mL、30mL洗滌三次,棄去水層。用濾紙吸去漏斗頸部水分,將有機層經(jīng)過無水硫酸鈉(約20g)濾入濃縮瓶中,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干,用氮氣除去殘留溶劑,準確加入2.0mL無水乙醇溶解殘留物,供氣相色譜用。

5.1.1.2 果醬:稱取5g(精確至0.001g)事先均勻化的果醬試樣于100mL具塞試管中,加入1mL1:1鹽酸酸化,10mL飽和氯化鈉溶液,渦旋混勻1min～2min,使其為均勻溶液,再分別以50mL、30mL、30mL無水乙醚提取三次,每次2min,用吸管轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中,加入10mL飽和氯化鈉溶液洗滌一次,再分別以碳酸氫鈉溶液30mL、30mL、30mL洗滌三次,棄去水層。用濾紙吸去漏斗頸部水分,將有機層經(jīng)過無水硫酸鈉(約20g)濾入濃縮瓶中,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干,用氮氣除去殘留溶劑,準確加入2.0mL無水乙醇溶解殘留物,供氣相色譜用。

5.2 儀器參考條件

5.2.1 色譜柱:弱*性石英毛細管柱,柱固定液為(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷,30m×0.32mm(內(nèi)徑),0.25μm(膜厚),或等效柱。

5.2.2 程序升溫條件見表1。

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下載地址：《GB 5009.31-2016 食品安全國家標準 食品中對羥基苯甲酸酯類的測定》