1 范圍

本標準規定了用分光光度法測定紅參中總糖(以葡萄糖計)的含量。

本標準適用于紅參中總糖含量的測定。

本標準方法的線性范圍為0.012mg~1.8mg。

本標準方法的定量限為1.2%。

2 規范性引用文件

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GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法

3 原理

試樣中水溶性糖和水不溶性多糖經鹽酸水解后轉化成還原糖，與3，5-二硝基水楊酸共熱后被還原成棕紅色的氨基化合物在波長520m處測定吸光度，吸光度值與還原糖含量成正比。

4 試劑和材料

除非另有說明，均使用分析純試劑，水為GB/T 6682 規定的三級水。

4.1 10%鹽酸溶液：取27mL鹽酸加水稀釋至100mL。

4.2 10%氫氧化鈉溶液：稱取100g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至1000mL。

4.3 30%氫氧化鈉溶液：稱取30g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100mL。

4.4 1%3，5-二硝基水楊酸溶液：稱取10g3，5-二硝基水楊酸，加水溶解并稀釋至1000mL。

4.5 顯色劑(DNS試劑)

a) 甲液：稱取6.9g結晶苯酚溶于15.2mL氫氧化鈉溶液(4.2)中，并稀釋至69mL，在此液中加入6.9g亞硫酸氫鈉，溶解即得。

b) 乙液：稱取255g酒石酸鉀鈉，加入300mL氫氧化鈉溶液(4.2)中，溶解后，再加入880mL3，5-二硝基水楊酸溶液(4.4)中，混勻即得。

將甲液與乙液混合搖勻，貯于棕色試劑瓶中，在室溫下放置7d后方可使用(4℃冰箱冷藏，保質期6個月)。

4.6 葡萄糖標準品(C6H12O6)：含量大于99.5%。

4.7 葡萄糖標準溶液[(C6H12O6)=lmg/mL]：準確稱取葡萄糖標準品10mg，加少量水溶解并稀釋定容至10mL，搖勻，備用(現用現配)。

4.8 碘化鉀一碘溶液：稱取1g碘和10g碘化鉀溶于50mL水中，再加2mL冰乙酸，加水稀釋至100mL。

4.9 0.1%酚酞指示劑：稱取0.1g酚酞，加95%乙醇溶解并稀釋至100mL。

4.10 D101型大孔吸附樹脂。

5 儀器和設備

5.1分光光度計。

5.2 分析天平：感量±0.0001g。

5.3 分析天平：感量±0.01g。

5.4 恒溫水浴鍋。

5.5 渦旋振蕩器。

5.6 粉碎機：配備0.25mm孔徑的金屬篩網。

6 分析步驟

6.1 試樣制備

取代表性樣品約100g，用粉碎機粉碎至通過0.25mm孔徑篩，裝人樣品瓶中備用。

6.2 試樣前處理

稱取1g試樣(精確到0.1mg)，置50ml具塞刻度試管中，用量筒加入25mL鹽酸溶液(4.1)，沸水浴中加熱20min后，用碘化鉀_碘溶液(4.8)檢査水解程度(取1滴水解液于白瓷板上，加人1滴碘化鉀—碘溶液，若不顯藍色，則已水解完全；如顯藍色，則未水解完全，繼續水解，每2min檢査一次水解程度，直至不顯藍色)。水解完全冷卻后將其全部轉移至100mL錐形瓶中，加人0.5mL酚酞指示劑(4.9)，用氫氧化鈉溶液(4.3)中和至溶液呈紅色，加入5gD101型大孔吸附樹脂(4.10)，在渦旋振蕩器上振蕩50min后過濾，加水定容至100mL再準確吸取10.0mL上述溶液置100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，此溶液為試樣測試液。

6.3 標準曲線的制定

分別吸取0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL和1.4mL的葡萄糖標準溶液(4.7)至25mL的具塞刻度試管中，此標準溶液葡萄糖含量相當于0mg、0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、1.0mg、1.2mg和1.4mg，加水至2mL，加入2 ML DNS試劑(4.5)，然后將試管放入沸水浴中加熱6min，立即在冰水中冷卻后，轉移至25mL容量瓶中，定容搖勻，用分光光度計在波長520nm處測定吸光度，以葡萄糖含量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。

6.4 測定

準確吸取1mL待測液(6.2)于25mL的具塞刻度試管中，按6.3條“加水至2mL”以下步驟操作，以空白溶液調零，分別測定吸光度值，根據回歸方程計算相應的糖含量。

6.5 空白試驗

除不加試樣外，其余操作步驟同試樣溶液測定。

7 結果計算

試料中總糖(以葡萄糖計)含量ω以質量分數(%)表示，按式(1)計算。

ω=（m1×V×f×10-3）/(m*V1)

式中：

m1——根據標準曲線計算的葡萄糖含量，單位為毫克(mg)；

V——試樣的定容體積，單位為毫升(mL)；

V1——比色測定時移取試樣待測液的體積，單位為毫升(mL)；

f——試樣的稀釋倍數；

m——試料的質量，單位為克(g)。

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下載地址：《NY/T 2332-2013 紅參中總糖含量的測定 分光光度法》