1.范圍

本標準規定了食品中致瀉大腸埃希氏菌( diarrheagenic escherichia coli)的檢驗方法。

本標準適用于食品中致瀉大腸埃希氏菌的檢驗。

2.術語和定義、縮略語

2.1 術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

2.1.1 致瀉大腸埃希氏菌 Diarrheagenic escherichia coli

一類能引起人體以腹瀉癥狀為主的大腸埃希氏菌,可經過污染食物引起人類發病。常見的致瀉大腸埃希氏菌主要包括腸道致病性大腸埃希氏菌、腸道侵襲性大腸埃希氏菌、產腸毒素大腸埃希氏菌、產志賀毒素大腸埃希氏菌(包括腸道出血性大腸埃希氏菌)和腸道集聚性大腸埃希氏菌。

2.1.2 腸道致病性大腸埃希氏菌 Enteropathogenic Escherichia coli

能夠引起宿主腸黏膜上皮細胞黏附及擦拭性損傷,且不產生志賀毒素的大腸埃希氏菌。該菌是嬰幼兒腹瀉的主要病原菌,有高度傳染性,嚴重者可致死。

2.1.3 腸道侵襲性大腸埃希氏菌 Enteroinvasive Escherichia coli

能夠侵入腸道上皮細胞而引起痢疾樣腹瀉的大腸埃希氏菌。該菌無動力、不發生賴氨酸脫羧反應、不發酵乳糖,生化反應和抗原結構均近似痢疾志賀氏菌。侵入上皮細胞的關鍵基因是侵襲性質粒上的抗原編碼基因及其調控基因,如iaH基因、ipaR基因(又稱為invE基因)。

2.1.4 產腸毒素大腸埃希氏菌 Enterotoxigenic escherichia coli

能夠分泌熱穩定性腸毒素或/和熱不穩定性腸毒素的大腸埃希氏菌。該菌可引起嬰幼兒和旅游者腹瀉,一般呈輕度水樣腹瀉,也可呈嚴重的霍亂樣癥狀,低熱或不發熱。腹瀉常為自限性,一般2d～3d即自愈。

2.1.5 產志賀毒素大腸埃希氏菌 Shiga toxin-producing Escherichia coli(腸道出血性大腸埃希氏菌 Enterohemorrhagic Escherichia coli)

能夠分泌志賀毒素、引起宿主腸黏膜上皮細胞黏附及擦拭性損傷的大腸埃希氏菌。有些產志賀毒素大腸埃希氏菌在臨床上引起人類岀血性結腸炎(HC或血性腹瀉,并可進一步發展為溶血性尿毒綜合征(HUS),這類產志賀毒素大腸埃希氏菌為腸道出血性大腸埃希氏菌。

2.1.6 腸道集聚性大腸埃希氏菌 Enteroaggregative escherichia coli

腸道集聚性大腸埃希氏菌不侵入腸道上皮細胞,但能引起腸道液體蓄積。不產生熱穩定性腸毒素或熱不穩定性腸毒素,也不產生志賀毒素。**特征是能對Hep-Σ細胞形成集聚性黏附,也稱Hep-2細胞黏附性大腸埃希氏菌。

2.2 縮略語

下列縮略語適用于本文件。

2.2.1 DEC:致瀉大腸埃希氏菌 Diarrheagenic Escherichia coli

2.2.2 EPEC:腸道致病性大腸埃希氏菌 Enteropathogenic Escherichia coli

2.2.3 EIEC:腸道侵襲性大腸埃希氏菌 Enteroinvasive escherichia coli

2.2.4 ETEC:產腸毒素大腸埃希氏菌 Enterotoxigenic Escherichia coli

2.2.5 STEC:產志賀毒素大腸埃希氏菌 Shiga toxin-producing Escherichia coli

2.2.6 EHEC:腸道出血性大腸埃希氏菌 Enterohemorrhagic Escherichia coli

2.2.7 EAEC:腸道集聚性大腸埃希氏菌 Enteroaggregative Escherichia coli

2.2.8 escV:蛋白分泌物調節基因, gene encoding lee-encoded typeⅢ secretion system factor

2.2.9 eae:緊密素基因, gene encoding intimin for Escherichia coli attaching and effacing

2.2.10 bfpB:束狀菌毛B基因, bundle- forming pilus B;

2.2.11 stx1:志賀毒素I基因, Shiga toxin one

2.2.12 stx2:志賀毒素Ⅱ基因, Shiga toxin two

2.2.13 lt:熱不穩定性腸毒素基因,heat- labile enterotoxin

2.2.14 st:熱穩定性腸毒素基因, heat-stable enterotoxin

2.2.15 stp(stla):豬源熱穩定性腸毒素基因,heat- stable enterotoxins initially discovered in the Isolates from pigs

2.2.16 sth(stb):人源熱穩定性腸毒素基因,heat- stable enterotoxins initially discovered in the isolates from human

2.2.17 inE:侵襲性質粒調節基因, invasive plasmid regulator

2.2.18 ipaH:侵襲性質粒抗原H基因, invasive plasmid antigen H-gene

2.2.19 aggR:集聚黏附菌毛調節基因,aggregative adhesive fimbriae regulator

2.2.20 uidA:B葡萄糖苷酶基因,β glucuronidase gene

2.2.21 astA:集聚熱穩定性毒素A基因, enteroaggregative heat- stable enterotoxin A

2.2.22 pic:腸定植因子基因, protein involved in intestinal colonization

2.2.23 LEE:腸細胞損傷基因座, Locus of enterocyte effacement

2.2.24 EAF:EPEC黏附因子, EPEC adhesive factor

3.設備和材料

除微生物實驗室常規滅菌及培養設備外,其他設備和材料如下:

3.1 恒溫培養箱:36℃±1℃,42℃±1℃。

3.2 冰箱:2℃～5℃。

3.3 恒溫水浴箱:50℃±1℃,100℃或適配1.5mL或2.0mL金屬浴(95℃～100℃)

3.4 電子天平:感量為0.1g和0.01g。

3.5 顯微鏡:10×～100×。

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