??? 2014年3月13日，臺灣地區"衛生福利部"發布部授食字第1031900266號公告，預告制定"食品中動物用藥殘留量檢驗方法-氯霉素類抗生素之檢驗"草案，20日內接收公眾意見或建議。

??? 食品中動物用藥殘留量檢驗方法-氯霉素類抗生素之檢驗草案

??? 1.? 適用范圍：本檢驗方法適用于農畜禽水產品之肌肉、蛋類、內臟、乳汁及蜂蜜中氯霉素（chloramphenicol、甲磺氯霉素（thiamphenicol、氟甲磺氯霉素（florfenicol及氟甲磺氯霉素胺（florfenicol amine之檢驗。

??? 2.? 檢驗方法：檢體經萃取及凈化后，以液相層析串聯質譜儀（liquid chromatograph/tandem mass spectrometer, LC/MS/MS分析之方法。

??? 2.1. 裝置：

??? 2.1.1. 液相層析串聯質譜儀：

??? 2.1.1.1. 離子源：電灑離子化（electrospray ionization, ESI。

??? 2.1.1.2. 層析管：XSELECT HSS PFP,2.5 μm,內徑 2.1 mm × 10 cm ,或同級品。

??? 2.1.2. 離心機（Centrifuge：可達3200 × g以上者。

??? 2.1.3. 振蕩器（Shaker。

??? 2.1.4. 均質機（Homogenizer。

??? 2.1.5. 氮氣蒸發裝置（Nitrogen evaporator。

??? 2.1.6. 固相真空萃取裝置（Solid phase extraction vacuum manifolds。

??? 2.1.7. 旋渦混合器（Vortex mixer。

??? 2.2. 試藥：甲酸與甲醇均采用液相層析級；正己烷、乙酸乙酯、氨水（30%、三氯醋酸（trichloroacetic acid及醋酸均采用試藥特級；去離子水（比電阻于 25℃ 可達 18 MΩ/cm以上；氯霉素、甲磺氯霉素、氟甲磺氯霉素及氟甲磺氯霉素胺對照用標準品；chloramphenicol-d5、thiamphenicol-d3、florfenicol-d3及florfenicol amine-d3同位素內部標準品。

??? 2.3. 器具及材料：

??? 2.3.1. 容量瓶：1 mL及100 mL.

??? 2.3.2. 離心管：50 mL,PP材質。

??? 2.3.3. 固相萃取匣（Solid phase extraction cartridge：Oasis MCX,6 mL,150 mg,或同級品。

??? 2.3.4. 濾膜：孔徑0.22 μm,PVDF材質。

??? 2.4. 試劑調制

??? 2.4.1. 50%甲醇溶液：

??? 取甲醇50 mL,加去離子水使成100 mL.

??? 2.4.2. 5%醋酸溶液：

??? 取醋酸5 mL,加去離子水使成100 mL.

??? 2.4.3. 5%三氯醋酸溶液：

??? 稱取三氯醋酸50 g,以去離子水溶解使成1000 mL.

??? 2.4.4. 含0.6%氨水之乙酸乙酯溶液：

??? 取氨水20 mL,加乙酸乙酯使成1000 mL.

??? 2.4.5. 含3%氨水之甲醇溶液：

??? 取氨水10 mL,加甲醇使成100 mL.

??? 2.4.6. 25%甲醇溶液：

??? 取甲醇25 mL,加去離子水使成100 mL.

??? 2.5. 移動相溶液之調制：

??? 2.5.1. 移動相溶液A:

??? 取甲酸1 mL,加去離子水使成1000 mL,以濾膜過濾，取濾液供作移動相溶液A.

??? 2.5.2. 移動相溶液B:甲醇。

??? 2.6. 標準溶液之配制：

??? 取氯霉素、甲磺氯霉素、氟甲磺氯霉素及氟甲磺氯霉素胺對照用標準品各約10 mg,?確稱定，分別以50%甲醇溶液溶解并定容至100 mL,作為標準原液，于 -20℃ 貯存。臨用時分別取適量各標準原液混合，以50%甲醇溶液稀釋至0.003~2.5 mg/mL,供作標準溶液。

??? 2.7. 內部標準溶液之配制：

??? 取chloramphenicol-d5、thiamphenicol-d3、florfenicol-d3及florfenicol amine-d3同位素內部標準品各約10 mg,?確稱定，共置于100 mL容量瓶中，以50%甲醇溶液溶解并定容，供作內部標準溶液，于 -20℃ 貯存。

??? 2.8. 檢液之調制：

??? 2.8.1. 萃取：

??? 2.8.1.1. 肌肉：

??? 將檢體細切均質后，取約5 g,精確稱定，置于離心管中，加入內部標準溶液50 mL及含0.6%氨水之乙酸乙酯溶液20 mL,旋渦混合1分鐘，振蕩10分鐘，以3200×g離心10分鐘，取上清液。加入5%醋酸溶液2 mL,旋渦混合1分鐘，取下層液，于45℃水浴中以氮氣濃縮至約2 mL,加入5%醋酸溶液4 mL,旋渦混合后，供凈化用。

??? 2.8.1.2. 蛋與內臟：

??? 將檢體混勻后，取約5 g,精確稱定，置于離心管中，加入內部標準溶液50 mL及5%三氯醋酸溶液20 mL,旋渦混合1分鐘，振蕩10分鐘，以3200×g離心10分鐘，取上清液，加入正己烷20 mL,旋渦混合1分鐘，以3200×g離心5分鐘，取下層液供凈化用。

??? 2.8.1.3. 乳汁：

??? 將檢體混勻后，精確量取5 mL,置于離心管中，加入內部標準溶液50 mL及5%三氯醋酸溶液20 mL,旋渦混合1分鐘，振蕩10分鐘，以3200×g離心10分鐘，取上清液供凈化用。

??? 2.8.1.4. 蜂蜜：

??? 將檢體混勻后，取約5 g,精確稱定，置于離心管中，加入內部標準溶液50 mL及5%醋酸溶液10 mL,旋渦混合1分鐘，振蕩10分鐘，供凈化用。

??? 2.8.2. 凈化：

??? 取2.8.1.節供凈化用溶液，注入預先以甲醇5 mL及去離子水 5 m L潤洗之固相萃取匣，棄流出液，以5%醋酸溶液5 mL流洗，棄流出液，再以含3%氨水之甲醇溶液5 mL沖提，收集沖提液，于45℃水浴中以氮氣濃縮至干，再以25%甲醇溶液定容至1 mL,經濾膜過濾后，供作檢液。

??? 2.9. 基質匹配檢量線之制作：

??? 取空白檢體，不添加內部標準溶液，依2.8.節萃取、凈化及以氮氣濃縮至干后，分別添加不同濃度標準溶液0.5 mL及內部標準溶液50 mL,再以去離子水定容至1 mL,經濾膜過濾后，依下列條件進行液相層析串聯質譜分析。就各氯霉素類抗生素與內部標準品之波峰面積比，與對應之各氯霉素類抗生素濃度，制作基質匹配檢量線。

??? 液相層析串聯質譜測定條件（注：

??? 層析管：XSELECT HSS PFP,2.5 μm,內徑2.1 mm × 10 cm.

??? 移動相溶液：A液與B液以下列條件進行梯度分析

??? 更多檢測方法請見：http://www.xmtbt-sps.gov.cn/detail.asp?id=45928