作者:百檢網 時間:2021-12-06 來源:互聯網
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將指數生長期的細胞暴露在細胞毒性藥物中,暴露的持續時間通常決定于產生*大損傷所需的時間,但是它也受藥物穩定性的影響。將藥物撤除后,讓細胞再增殖 2~3 個群體倍增時間(PDT ),這樣就可以把能夠增殖的存活細胞與那些不能增殖的存活細胞區別開來。然后用 MTT 染料還原反應測定存活細胞的數目。只要 MTT—甲臜產物溶于適當溶劑中,就可以用分光光度法來定量。
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先將不同濃度的藥物加入到微滴定板上培養的單層細胞中溫育(圖 22.5), 撤去藥物,每日換液至 2~3 個 PDT , 然后再次更換培養液并在每個孔中加入 MTT。于暗處溫育 4 h ,然后撤除培養基和 MTT 。將不溶于水的 MTT—甲臜結晶溶于 DMSO 中,加人緩沖液調節*終的 pH , 在 ELISA 讀板儀上記錄吸光值.