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只需30分鐘可檢測鯉科皰疹病毒病原

作者:百檢網 時間:2021-12-27 來源:互聯網

? ? 鯉科皰疹病毒III型是皰疹病毒科中具有強致性和強傳染性的成員,對該病毒的檢測方法主要是酶聯免疫吸附測定法、免疫組化法、聚合酶鏈式反應法(PCR法)和環介導恒溫擴增法(LAMP),這些方法由于在操作簡便性、檢測靈敏度、檢測準確性和現場可操作性等方面存在的問題而使用受限。
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? ? 近期,美國俄勒岡州立大學的科學家公布了一種檢測鯉科皰疹病毒III型的方法——重組酶聚合酶擴增法并結合核酸試紙檢測,大大降低了操作的復雜性,提高了檢測的靈敏度和準確性。該方法只需對樣品進行簡單的預處理,在37℃條件下完成病毒DNA的擴增,并使用核酸檢測試紙對產物進行檢測,全部過程只需30分鐘,可檢出10個拷貝數的病毒基因組DNA,陽性檢出率高于熒光定量PCR,真正實現了塘邊檢測。
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? ? 重組酶聚合酶擴增技術是Piepenburg等于2006年**提出的一種新型的核酸恒溫擴增技術,主要依賴于重組酶、單鏈DNA結合蛋白和鏈置換DNA聚合酶這三種酶,*適宜反應溫度在37℃~42℃之間,無需復雜的樣品前處理和核酸變性,可擴增DNA和RNA,一般可在10分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物,同時可實現數據的實時讀取和多個模板的同步檢測,被認為可真正替代PCR的技術。由于該方法是在恒溫下完成核酸的擴增,結合核酸檢測試紙,可在養殖現場推廣使用,具有廣闊的應用前景。 ? ? ? 黃**
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