**部分、制藥用水所檢項目有哪些？

制藥用水根據不同的使用范圍分為飲用水、純化水、注射用水和滅菌注射用水。這里我們只針對純化水（PW）和注射用水（WFI）進行分析討論。

根據中國藥典規定，PW需檢驗項目為：性狀、酸堿度、氨、硝酸鹽、亞硝酸鹽、電導率、總有機碳（TOC）、不揮發物、重金屬、微生物限度。

WFI所需檢驗項目與PW相比，將酸堿度更換為pH值，增加了細菌內毒素控制，其余檢驗項目與PW基本相同，但是微生物的控制標準要嚴于PW的標準。?

第二部分、微生物限度檢測方法的確認

根據非無菌產品微生物限度檢測方法的要求，應進行培養基適用性檢查和計數方法適用性試驗。純化水培養基適用性檢查方面，相應進行R2A瓊脂培養基的適用性檢查，菌株為銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌。以及無菌培養試驗。

方法：取不大于100cfu菌液，于購買的R2A瓊脂培養基，快速涂布，每一菌株平行2個平板。同樣操作涂布與中檢院購買的對照培養基，培養5天。??

無菌培養試驗：取2平皿，作為陰性對照培養。

標準：被測培養基上的菌落平均數與對照培養基上的菌落平均數比值應在0.5-2之間，菌落形態、大小一致。

無菌培養，培養基上無微生物生長。

純化水計數方法適用性方面，水作為無抑菌作用的溶劑，進行微生物回收試驗意義不大，因此，應不進行計數方法適用性試驗。R2A培養基，營養欠豐富，有利于損傷微生物的回收，培養時間不低于5天。

第三部分、準備工作注意哪些？

（1）儀器設備及耗材：

檢測前要根據所要檢測的項目，檢查所用儀器/設備（如天平、pH計、電導率儀、培養箱等）是否經過了校準，是否在校準效期內，有些儀器還需要使用前校準或日校，比如天平，pH計。

微生物限度檢驗所用的生物安全柜（或超凈工作臺）、微生物過濾系統和培養箱應保證在確認效期內。用到的關鍵耗材，如微孔濾膜及濾杯等物料應保證其無菌性，可購買一次性無菌過濾器，也可在經驗證的滅菌程序下滅菌，并在經驗證的有效期內使用，但微孔濾膜不建議用戶自行濕熱滅菌，因為濕熱滅菌可能會引起濾膜孔徑的改變，除非有充分的證據證明滅菌后的濾膜仍滿足使用需求。這些的確認合格與否，將直接關系到檢驗結果的準確性。

細菌內毒素的檢驗可以在超凈工作臺內進行，也可以在普通試驗臺上進行試驗操作，但仍需注意操作環境的潔凈狀況，操作房間應保持較好的衛生狀況，避免環境對測試結果的影響。

（2）試劑試液

檢查要檢測項目所用到的試劑是否在有效期內。

pH計校準所用標準緩沖液是否合適，一般定點用的緩沖液與所測樣品的pH值接近，樣品的pH值要在定點和調斜率的緩沖液pH值范圍內。pH緩沖液的溫度應在25℃±2℃范圍內。

檢測微生物限度所用的培養基為R2A瓊脂培養基，配制時應使用在有效期及開瓶有效期內的干粉培養基，培養基應進行培養基適用性檢查，中國藥典規定，如培養基配制過程已經過驗證，則可以只針對每批干粉培養基進行適用性檢查，EP和USP則要求須對每個配制批進行檢查。

檢測細菌內毒素所用鱟試劑和內毒素標準品是否在效期內，凝膠法鱟試劑應進行靈敏度復核試驗，光度法用鱟試劑應進行標準曲線的可靠性試驗。

第四部分、影響電導率結果的因素？

影響電導率測定結果的因素有樣品的溫度和可溶性氣體（如空氣中的CO2）。

將取樣容器取滿，密封，應在盡量短的時間內進行測定，能夠減少可溶性氣體對測定結果的影響。

第五部分、測定TOC時的注意事項？

TOC測定時，應避免有機物和CO2對測定結果的影響。

取樣時應采用密閉玻璃容器，容器頂空應盡量小，取樣后，應立即測試，以減少塞子和容器對測定結果的影響。

第六部分、測定需比色的檢驗項目時的注意事項

在測定硝酸鹽、亞硝酸鹽、重金屬和氨時，均采用比色法，需要注意遵守平行原則，須采用同套的比色管，對比時所有比色管中液體應體積相同。觀察方式有兩種，一種是在白色背景上自上而下透視，適于色澤較淺時采用，另一種是在白色背景前平視觀察，適于色澤較深時采用。同時檢驗人員不應有色弱或色盲等。

第七部分、微生物限度檢查時注意事項？

人員應經過培訓且考核合格，應具備微生物的基礎知識和潔凈室的行為規范。進入潔凈區前后應檢查潔凈區內壓差及溫濕度是否在規定范圍內；準備所需物品和樣品經消毒劑擦拭消毒后，放入傳遞窗對表面進行紫外消毒，紫外消毒只能作為輔助手段，而不能完全代替化學消毒劑，紫外消毒時應注意避免對樣品的影響。

檢驗時，*好將檢驗所用物品器具和樣品一次性全部放入檢驗設備中，但實際工作中如物料很多，全部傳入影響操作和氣流，可以分多次，一般先檢驗WFI再檢驗PW。檢驗開始前，手部應放入設備內與物料一起自凈數分鐘。操作進行中，應避免微生物的污染，手部*好不要離開操作區域，不可避免時，應注意對手部及腕部的消毒。檢驗中動作幅度要小，避免影響氣流流向。

應采用薄膜過濾法對WFI及PW進行檢驗，樣品過濾后，應保證濾膜的干燥度。貼濾膜時，應避免產生氣泡，而影響微生物的生長。水系統運行穩定時，為了使檢驗結果更加能反映出水系統的真實情況，樣品檢驗量在滿足法規的前提下，可根據樣品中微生物負載情況定期評估后確定。

檢驗過程中應全程持續監測沉降菌，檢驗結束后要對設備表面和人員雙手進行表面微生物監測，浮游菌和懸浮粒子也應定期監測。樣品培養時，可不必逐天記錄微生物生長數量，但應注意避免個別時出現嚴重的菌落蔓延情況而導致無法計數。

第八部分、細菌內毒素檢查時注意事項

細菌內毒素工作標準品和鱟試劑在使用前應逐支檢查外觀，發現安瓶有裂縫，或試劑顏色改變時，不能使用，使用前應保證其溫度處于室溫。開安瓿瓶時要注意安全問題，必要時可借助工具開啟。

溶解鱟試劑及混勻供試品和鱟試劑時，不要劇烈振蕩避免產生氣泡。

由于凝集反應是不可逆的，所以在反應過程中及觀察結果時應注意不要使試管受到振動，以免使凝膠破碎產生假陰性結果。乙醇消毒劑有可導致BET出現假陰性的風險，檢驗過程中應避免使用。

第九部分、偏差調查

對測定結果不合格的樣品，應及時報告主管，并啟動OOS調查，找出根本原因，并制定預防措施，防止再次發生類似情況。所有檢項測定完成后，出具檢驗報告。