漆樹有效成分檢測
作者：百小檢 時間：2022-09-02 來源：互聯(lián)網(wǎng)
漆樹提取物中含有的顏木素、漆黃素和硫黃菊素等多酚類化合物，具有抗氧化、抑菌、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗病毒、保護(hù)神經(jīng)和防止神經(jīng)衰老等生物活性。 此外漆樹中的有效成分還可以用于保健食品、化妝品和醫(yī)藥等行業(yè)，漆蠟也是重要的化工原料檢測種類之一。
一、漆樹行業(yè)分析
從上面我們也可以看出，漆樹屬于那種“混身都是寶”的經(jīng)濟(jì)作物。雖然我國漆樹種植規(guī)模很大，但是漆樹的資源利用卻十分有限，產(chǎn)品應(yīng)用單一，標(biāo)準(zhǔn)不完善，比如新發(fā)布的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)LY/T3280-2021《漆樹提取物》 甚至還處于尚未實(shí)施階段。相比國外，漆樹的藥用成分研究動力嚴(yán)重不足，難以形成高價值產(chǎn)業(yè)，不足以形成更加有力的經(jīng)濟(jì)增長點(diǎn)，所以漆樹行業(yè)發(fā)展已經(jīng)到了亟待改善的地步。通過漆樹有效成分分析，可以幫助我們在科研、 生產(chǎn)和開發(fā)應(yīng)用以及外貿(mào)等領(lǐng)域促進(jìn)漆樹資源的高價值化利用。
二、現(xiàn)有檢測方法介紹
目前，漆樹的飽和漆酚、單不飽和漆酚、二不飽和漆酚和三不飽和漆酚等成分的檢測方法主要有高效液相色譜（HPLC）、紅外（IR）、紫外光譜（UV spectrum）、核磁共振（NMR）、薄層層析（TLC）、氣相色譜-質(zhì)譜（GC/MS）等檢測手段，漆黃素、黃顏木素、硫黃菊素和紫鉚花素類化合物主要的分析檢測方法包括紫外分光光度法（UV spectrum、高效液相色譜法（HPLC）、高效液相色譜/質(zhì)譜法（HPLC-MS）和高效毛細(xì)管電泳法等，其中紫外分光光度法和高效液相色譜法*為常用。但是，目前并沒有關(guān)于漆樹中以上主要有效成分的權(quán)威的、統(tǒng)一的、快速的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)，這也使得行業(yè)中魚龍混雜，無法對行業(yè)發(fā)展形成良性刺激，從而*大的抑制了漆樹行業(yè)的發(fā)展，阻礙了這些有效成分的進(jìn)一步應(yīng)用。
三、試驗(yàn)方法驗(yàn)證
LY/T3280-2021《漆樹提取物》只提出了漆黃素、黃顏木素、硫黃菊素的檢測分析方法。該標(biāo)準(zhǔn)中給出的方法是參考的國標(biāo)GB/T 27579 《精油 高效液相色譜分析 通用法》，利用高效液相色譜-紫外檢測器和外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。拜恩工程師團(tuán)隊(duì)通過對該方法的檢測波長、 流動相系統(tǒng)、 流動相洗脫梯度、 進(jìn)樣體積、 流速和柱溫等多方面因素進(jìn)行考察，在參考了相關(guān)碩士、博士的論文和分析數(shù)據(jù)，經(jīng)過驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)并多次調(diào)整后，*終也建議采取高效液相色譜（HPLC）是檢測漆樹有效成分的*佳方法。
四、高效液相色譜法介紹
1.樣品制備注意事項(xiàng)
a.**為了防止漆樹樣品中水分對結(jié)果的影響，并保證其結(jié)構(gòu)不被破壞，提高提取效率，需要將漆樹樣品干燥處理即陰干，使得到的試樣含水率不大于 3%后，用粉碎機(jī)將其粉碎，密閉干燥保存。
b.鑒于不同漆樹樣品中不同有效成分含量的差別，在制定標(biāo)準(zhǔn)曲線的時候，漆酚標(biāo)準(zhǔn)溶液梯度從 0、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL、20.00 μg/mL、40.00 μg/mL、60.00 μg/mL、80.00 μg/mL、100.00 μg/mL、500.00 μg/mL 進(jìn)行配置，黃酮標(biāo)準(zhǔn)溶液梯度從 0、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL、20.00 μg/mL、40.00 μg/mL、60.00μg/mL、80.00 μg/mL、100.00 μg/mL、0.50 mg/mL、1.00 mg/mL、2.00 mg/mL 進(jìn)行配置。該漆樹漆酚試樣溶液的制備方法我們是通過對其提取溶劑、料液比、浸泡時間、提取次數(shù)、萃取溶劑的考察及其正交試驗(yàn)得到。
2.試驗(yàn)步驟
精確稱取漆樹樣品 10 g（精確到 0.1 mg）于 500 mL 圓底燒瓶中，加 200 mL 醇常溫下浸泡 3 h，在 50℃下用旋蒸蒸發(fā)儀減壓回收溶劑，所得浸膏用 300mL 氯仿-水（體積比 3:1）溶液萃取 3 次，收集氯仿層，濃縮后，所得漆樹漆酚提取物樣品浸膏用甲醇溶解定容至 50 mL，經(jīng)過 0.22 μm 濾膜過濾，濾液用于高效液相色譜儀測定.
總結(jié)：**制備樣品測試溶液，然后利用高效液相色譜儀檢測，*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品中各漆酚、黃酮的濃度，再將所得結(jié)果進(jìn)行換算，得到*終漆樹樣品中飽和漆酚、單不飽和漆酚、二不飽和漆酚和三不飽和漆酚以及黃顏木素、漆黃素、紫鉚花素和硫黃菊素的含量。
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