作者:小強 時間:2022-10-20 來源:互聯網
食品空腸彎曲菌怎么檢測?目前對于食品空腸彎曲菌有對應的檢測方法標準依據。今天百檢網就給大家介紹一下食品空腸彎曲菌的測定方法相關信息。
檢測方法標準依據:GB 4789.9-2014 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 空腸彎曲菌檢驗
1.范圍
本標準規定了食品中空腸彎曲菌( Campylobacter jejuni)的檢驗方法。
本標準適用于食品中空腸彎曲菌的檢驗。
2.設備和材料
除微生物實驗室常規滅菌及培養設備外,其他設備和材料如下:
a) 恒溫培養箱:25℃±1℃、36℃±1℃、42℃±1℃;
b) 冰箱:2℃~5℃
c) 恒溫振蕩培養箱:36℃±1℃、42℃±1℃;
d) 天平:感量0.1g;
e) 均質器與配套均質袋;
f) 振蕩器;
g) 無菌吸管:1mL(具001m刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸頭;
h) 無菌錐形瓶:容量100mL、200mL、2000mL;
i) 無菌培養皿:直徑90mm;
j) pH計或pH比色管或精密pH試紙;
k) 水浴裝置:36℃±1℃、100℃;
l) 微需氧培養裝置:提供微需氧條件(5%氧氣、10%二氧化碳和85%氮氣);
m) 過濾裝置及濾膜(0.22μm、0.45μm);
n) 顯微鏡:10倍~10倍,有相差功能;
o) 離心機:離心速度≥20000g;
p) 比濁儀;
q) 微生物生化鑒定系統。
3.培養基和試劑
3.1 Bolton肉湯( Bolton broth):見附錄A中A.1。
3.2 改良CCD瓊脂( modified Charcoal Cefoperazone Deoxycholate Agar, cCDA):見附錄A中A2。
3.3 哥倫比亞血瓊脂( Columbia blood agar):見附錄A中A3。
3.4 布氏肉湯( Brucella broth):見附錄A中A4。
3.5 氧化酶試劑:見附錄A中A.5。
3.6 馬尿酸鈉水解試劑:見附錄A中A.6
3.7 Skirrow血瓊脂( Skirrow blood agar):見附錄A中A.7。
3.8 吲哚乙酸酯紙片:見附錄A中A.8。
3.9 0.1%蛋白胨水:見附錄A中A9。
3.10 lmol/L硫代硫酸鈉(Na2S2O3)溶液:見附錄A中A.10。
3.11 3%過氧化氫(H2O2)溶液:見附錄A中A.11。
3.12 空腸彎曲菌顯色培養基。
3.13 生化鑒定試劑盒或生化鑒定卡。
4.檢驗程序
空腸彎曲菌檢驗程序見圖1。
5.操作步驟
5.1 樣品處理
5.1.1 一般樣品
取25g(mL)樣品(水果、蔬菜、水產品為50g)加入盛有225 mL Bolton肉湯的有濾網的均質袋中(若為無濾網均質袋可使用無菌紗布過濾),用拍擊式均質器均質1min~2min,經濾網或無菌紗布過濾,將濾過液進行培養。
5.1.2 整禽等樣品
用200mL0.1%的蛋白胨水中充分沖洗樣品的內外部,并振蕩2min~3min,經無菌紗布過濾至250mL離心管中,16000g離心15min后棄去上清,用10mL0.1%蛋白胨水懸浮沉淀,吸取3mL于100mLBolton肉湯中進行培養。
5.1.3 貝類
取至少12個帶殼樣品,除去外殼后將所有內容物放到均質袋中,用拍擊式均質器均質1min~2min,取25g樣品至225mL Bolton肉湯中(1:10稀釋),充分震蕩后再轉移25mL于225mL Bolton肉湯中(1:100稀釋),將1:10和1:100稀釋的 Bolton肉湯同時進行培養。
5.1.4 蛋黃液或蛋漿
取25g(mL)樣品于125mL Bolton肉湯中并混勻(16稀釋),再轉移25mL于100mL Bolton肉湯中并混勻(1:30稀釋),同時將1:6和1:30稀釋的 Bolton肉湯進行培養。
5.1.5 鮮乳、冰淇淋、奶酪等
若為液體乳制品取50g;若為固體乳制品取50g加入盛有50mL0.1%蛋白胨水的有濾網均質袋中,用拍擊式均質器均質15s~30s,保留過濾液。必要時調整pH值至7.5±0.2,將液體乳制品或濾過液以20000g離心30min后棄去上清,用l0mL Bolton肉湯懸浮沉淀(盡量避免帶入油層),再轉移至90mLBolton肉湯進行培養。
………………
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