作者:小強(qiáng) 時(shí)間:2022-10-21 來源:互聯(lián)網(wǎng)
食品中大腸菌群怎么檢測?目前對(duì)于食品中大腸菌群有對(duì)應(yīng)的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。今天百檢網(wǎng)就給大家介紹一下食品中大腸菌群的測定方法相關(guān)信息。
檢測方法標(biāo)準(zhǔn)依據(jù):GB 4789.3-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)
檢驗(yàn)原理
1 MPN法
MPN法是統(tǒng)計(jì)學(xué)和微生物學(xué)結(jié)合的一種定量檢測法。待測樣品經(jīng)系列稀釋并培養(yǎng)后,根據(jù)其未生長的*低稀釋度與生長的*高稀釋度,應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)概率論推算岀待測樣品中大腸菌群的*大可能數(shù)。
2平板計(jì)數(shù)法
大腸菌群在固體培養(yǎng)基中發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,在指示劑的作用下形成可計(jì)數(shù)的紅色或紫色,帶有或不帶有沉淀環(huán)的菌落。
設(shè)備和材料
除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃C。
2 冰箱:2℃~5℃
3 恒溫水浴箱:46℃±1℃
4 天平:感量0.1g。
5 均質(zhì)器。
6 振蕩器。
7 無菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸頭。
8 無菌錐形瓶:容量500mL。
9 無菌培養(yǎng)皿:直徑90mm。
10 pH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙。
11 菌落計(jì)數(shù)器。
培養(yǎng)基和試劑
1 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨( lauryl sulfate tryptose,LST)肉湯:見A.1。
2 煌綠乳糖膽鹽( brilliant green lactose bile,BGLB)肉湯:見A.2。
3 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂( violet red bile agar,VRBA):見A.3。
4 無菌磷酸鹽緩沖液:見A.4。
5 無菌生理鹽水:見A.5。
6 1mol/ L NaOh溶液:見A.6。
7 1mol/LHCl溶液:見A.7。
**法大腸菌群MPN計(jì)數(shù)法
操作步驟
1 樣品的稀釋
1.1 固體和半固體樣品:稱取25g樣品,放入盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi),8000r/min~10000r/min均質(zhì)lmin~2min,或放入盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2min,制成1:10的樣品勻液。
1.2 液體樣品:以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)或其他無菌容器中充分振搖或置于機(jī)械振蕩器中振搖,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。
1.3 樣品勻液的pH應(yīng)在6.5~7.5之間,必要時(shí)分別用1mol/ L Nah或1mol/LHCl調(diào)節(jié)。
1.4 用ⅠmL無菌吸管或微量移液器吸取Ⅰ:10樣品勻液lmL,沿管壁緩緩注9mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌試管中(注意吸管或吸頭**不要觸及稀釋液面),振搖試管或換用1支1mL無菌吸管反復(fù)吹打,使其混合均勻,制成1:100的樣品勻液。
1.5 根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì),按上述操作,依次制成十倍遞増系列稀釋樣品勺液。每遞増稀釋1次,換用1支1mL無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢,全過程不得超過15min。
2 初發(fā)酵試驗(yàn)
每個(gè)樣品,選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液(液體樣品可以選擇原液),每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯,每管接種ⅠmL(如接種量超過ⅠmL,則用雙料LST肉湯),36℃士1℃培養(yǎng)24h土2h,觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生,24h±2h產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)(證實(shí)試驗(yàn)),如未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至48h士2h,產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。
3 復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)(證實(shí)試驗(yàn))
用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物Ⅰ環(huán),移種于煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)管中36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h,觀察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者,計(jì)為大腸菌群陽性管。
………………
關(guān)于食品中大腸菌群檢測測定方法相關(guān)信息就介紹到這里。做檢測,上百檢,百檢網(wǎng)為您帶來一站式檢測服務(wù)。
1、檢測行業(yè)全覆蓋,滿足不同的檢測;
2、實(shí)驗(yàn)室全覆蓋,就近分配本地化檢測;
3、工程師一對(duì)一服務(wù),讓檢測更精準(zhǔn);
4、免費(fèi)初檢,初檢不收取檢測費(fèi)用;
5、自助下單 快遞免費(fèi)上門取樣;
6、周期短,費(fèi)用低,服務(wù)周到;
7、擁有CMA、CNAS、CAL等權(quán)威資質(zhì);
8、檢測報(bào)告權(quán)威有效、中國通用;
①本網(wǎng)注名來源于“互聯(lián)網(wǎng)”的所有作品,版權(quán)歸原作者或者來源機(jī)構(gòu)所有,如果有涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一個(gè)月內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,聯(lián)系郵箱service@baijiantest.com,否則視為默認(rèn)百檢網(wǎng)有權(quán)進(jìn)行轉(zhuǎn)載。
②本網(wǎng)注名來源于“百檢網(wǎng)”的所有作品,版權(quán)歸百檢網(wǎng)所有,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用。想要轉(zhuǎn)載本網(wǎng)作品,請(qǐng)聯(lián)系:service@baijiantest.com。已獲本網(wǎng)授權(quán)的作品,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明"來源:百檢網(wǎng)"。違者本網(wǎng)將追究相關(guān)法律責(zé)任。
③本網(wǎng)所載作品僅代表作者獨(dú)立觀點(diǎn),不代表百檢立場,用戶需作出獨(dú)立判斷,如有異議或投訴,請(qǐng)聯(lián)系service@baijiantest.com