1.范圍

本標準規定了食品中殘留過氧化氫的測定方法。

本標準適用于食品中殘留過多化氫的測定。碘量法定量檢出限為3mg/kg;鈦鹽比色法定量檢出限為1.6mg/kg,定性檢出限為0.5mg/kg。

2.規范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本適用于本標準。

GB/T 601 化學試劑 標準滴定溶液的制備

GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法(GB/T 6682-2008,ISO 3695:1987,MOD)

3.碘量法

3.1 原理

食品中的強氧化物在稀硫酸中使碘化鉀氧化，產生定量的碘，生成的碘以淀粉作指示劑，用硫代硫酸鈉標準溶液滴定得到強氧化物總量。加入過氧化氫酶分解去除試樣中的過氧化氫，用硫代硫酸鈉標準溶液滴定去除過氧化氫后的其他氧化物含量。2次滴定結果之差可計算得到樣品中過氧化氫的含量。

3.2 試劑與材料

除另有說明外，所有試劑均為分析純,水為GB/T 6682規定的三級水。

3.2.1 0.1mol/L硫代硫酸鈉標準標準儲備液：按GB/T 601 規定的方法配制和標定。

3.2.2 0.0020mol/L硫代硫酸鈉標準使用液：臨用時用標準儲備液稀釋。

3.2.3 淀粉指示劑(10g/L):稱取可溶性淀粉0.50g,加少許水,調成糊狀，倒入50mL沸水中調勻，煮沸。臨用時現配。

3.2.4 碘化鉀溶液(100g/l):稱取10.0g碘化鉀，加水溶解，定容至100mL，貯于棕色瓶中。臨用時現配。

3.2.5 10%稀硫酸(質量濃度)：量取60mL硫酸,緩緩注入700mL水中,冷卻,稀釋至1000mL。

3.2.6 3%鉬酸銨溶液:稱取3.00g鉬酸銨,加100mL水溶解。

3.2.7 0.1%過氧化氫酶溶液：稱量0.10g過氧化氫酶(單位活力大于200000U/mL),用100mL蒸餾水分多次將其溶解,冷藏可保存兩個月。

3.2.8 亞鐵氰化鉀溶液:稱取106.0g亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)6·3H2O],用水溶解,并稀釋至1000mL。

3.2.9 乙酸鋅溶液:稱取220.0g乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O],加30mL冰乙酸,用水溶解,稀釋至1000mL。

3.2.10 活性炭:將100g活性炭加至750mL 1mol/L鹽酸中,回流1h～2h,過濾,用水洗數次,至濾液中無鐵離子(Fe3+)為止,然后置于110℃烘箱中烘干。

檢驗鐵離子方法：利用普魯士藍反應,將20g/L亞鐵氰化鉀與1%鹽酸等量混合,將上述洗出濾液滴入，如有鐵離子則產生藍色沉淀。

3.3 儀器和設備

3.3.1 電子天平(感量0.01g)。

3.3.2 高速搗碎機。

3.4 樣品處理

3.4.1 固體樣品

稱取粉碎均勻的試樣10g(精確到0.01g),加適量水溶解,轉移入100mL容量瓶中,對蛋白質、脂肪含量較高的樣品可加入乙酸鋅溶液5mL,亞鐵氰化鉀溶液5mL,加水定容至刻度,搖勻,浸泡30min,用濾紙過濾,濾液作為試樣液備用。

3,4.2 液體樣品

吸取25g(精確到0.01g)試樣于100mL容量瓶中,對蛋白質、肪含量較高的樣品可加入乙酸鋅溶液5mL,亞鐵氰化悍溶液5mL,加水定容至刻度,搖勻,用濾紙過濾,濾液作為試樣液備用。

3.4.3 如樣品濾液有顏色,加入1g活性炭,振搖1min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,濾液待用。

3.5 測定

3.5.1 試樣測定

分別吸取濾液25.0mL,置于A、B兩個250mL碘量瓶中,A瓶中加入0.1%過氧化氫酶溶液(3,2,7)0.5mL,混勻,放置10min(放置過程中搖動數次)。在A、B兩瓶中各加入10%硫酸5.0mL、碘化鉀溶液5.0m1,3%鉬酸銨3滴,混勻,置暗處放置10min,各加水50mL,分別用硫代硫酸鈉標準溶液(3,2.2)滴定,待滴至微黃色時,加淀粉指示劑0.5mL,繼續滴至藍色消失,分別記錄A、B兩瓶消耗硫代硫酸鈉標準溶液的毫升數。

3.5.2 結果計算

試樣中過氧化氫的含量式(1)進行計算：

X=[(VB-VA)×c×B×34.02]/m×1000…………(1)

X——樣品中過氧化氫的含量,單位為毫克每千克(mg/kg);

VA——A瓶中消耗硫代硫酸鈉標準滴定溶液的體積,單位為毫升(mL);

VB——B瓶中消耗硫代硫酸鈉標準滴定溶液的體積,單位為毫升(mL);

c——硫代硫酸鈉標準滴定溶液的濃度,單位為摩爾每升(mol/L);

m——試樣質量,單位為克(g);

B—一樣品稀釋倍數;

34.02——與1.00mL硫代硫酸鈉標準溶液[c(Na2S2O3)=1.000mol/L]相當的過氧化氫的質量,單位為毫克(mg)。

計算結果保留三位有效數字。

3.6 允許差

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的**差值不得超過算術平均值的10%。

4.鈦鹽比色法

4.1 原理

過氧化氫在酸性溶液中,與鈦離子生成穩定的橙色絡合物,在430nm下,吸光度與樣品中過氧化氫含量成正比,用比色法測定樣品中過氧化氫的含量。

4.2 試劑與材料

除另有說明外,所有試劑均為分析純,水為GB/T 6682規定的三級水。

4.2.1 高錳酸鉀標準溶液[c(1/5KMnO4)=0.100mol/L按GB/T 601規定的方法配制和標定。

《GB/T 23499-2009 食品中殘留過氧化氫的測定方法》