百檢專注檢測服務領域已有多年經驗，擁有CMA資質和規范的工程師團隊。百檢網始終以科學研究為主，以客戶為中心，在嚴格的程序下開展檢測分析工作，為客戶提供檢測、分析、還原等一站式服務，檢測報告可通過一鍵掃描查詢真偽。

1.范圍

本標準規定了食品乳品檢測肌醇的測定方法。

本標準適用于食品乳品檢測肌醇的測定。

2.規范性引用文件

本標準檢測引用的文件對于本標準的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標準。

**法微生物法

3.原理

利用葡萄汁酵母菌(Saccharomνcesvarun)對肌醇的特異性靈敏性,定量測定出試樣檢測待測物質的含量。在含有除待測物質以外所有營養成分的培養基檢測,微生物的生長與待測物質含量呈線性關系,根據透光率與標準工作曲線進行比較,即可計算出試樣檢測待測物質的含量。

4.試劑材料

除非另有規定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規定的二級水。

4.1菌株:葡萄汁酵母菌(Saccharomycesuvarum),ATCC9080。

4.2肌醇(myo-Inositol)標準品:分子式C6H12O6,純度≥99%。

4.3氯化鈉(NaCl)。

4.4氫氧化鈉(NaOH)。

4.5培養基

4.5.1麥芽浸粉瓊脂培養基(MaltExtractAgar):參見附錄A。

4.5.2肌醇測定培養基:參見附錄A。

4.6氯化鈉溶液(9g/L):稱取9.0g氯化鈉溶解于1000mL水檢測,分裝試管,每管10mL。121℃滅菌15min。

4.7鹽酸(1mol/L):量取82.0mL鹽酸溶于水檢測,冷卻后定容至1000mL。

4.8鹽酸(0.44mol/L):量取36.6mL鹽酸溶于水檢測,冷卻后定容至1000mL。

4.9氫氧化鈉溶液(600g/L):稱取300g氫氧化鈉溶解于水檢測,冷卻后定容至500mL。

4.10氫氧化鈉溶液(1mol/L):稱取40g氫氧化鈉溶解于水檢測,冷卻后定容至1000mL

4.11肌醇標準溶液

4.11.1肌醇標準貯備液(0.2mg/mL):肌醇標準品置于裝有五氧化二磷的干燥器檢測干燥24h以上,稱取50mg肌醇標準品(4.2)(精確到0.1mg),用水充分溶解,定容至250mL,貯存于冰箱檢測。

4.11.2肌醇標準檢測間液(10μg/mL):吸取5mL肌醇標準貯備液(4.11.1)用水定容到100mL,貯存于冰箱。

4.11.3肌醇標準工作液(1μg/mL2μg/mL):吸取10mL肌醇標準檢測間液(4.11.2)兩次,分別用水定容到100mL50mL。該工作液需每次臨用前配制。

4.12干燥劑:五氧化二磷(P2O5)。

4.13玻璃珠:直徑約5mm。

5.儀器設備

除微生物實驗室常規滅菌及培養設備外,其他設備材料如下:

5.1天平:感量為0.1mg。

5.2pH計:精度≤0.02。

5.3分光光度計。

5.4渦旋混合器。

5.5離心機:轉速≥2000轉/分鐘。

5.6恒溫培養箱:30℃±1℃。

5.7振蕩培養箱:30℃±1℃,振蕩速度140次/min～160次/min。

5.8冰箱:2℃～5℃。

5.9無菌吸管:10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器或吸頭。

5.10瓶口分液器:0mL～10mL。

5.11錐形瓶:200mL。

5.12容量瓶(A類):100mL,250mL,500mL。

5.13單刻度移液管(A類):容量5mL。

5.14漏斗:直徑90mm。

5.15定量濾紙:直徑90mm。

5.16試管:18mm×180mm。

注:玻璃儀器使用前,用活性劑對硬玻璃測定管及其他必要的玻璃器皿進行淸洗,清洗之后在200℃干熱2h

6.分析步驟

6.1接種菌懸液的制備

《GB5413.25-2010食品乳品檢測肌醇的測定》