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1范圍

本標準規定了乳與乳制品檢測非蛋白氮含量的測定方法。

本標準適用于鮮奶、乳粉檢測非蛋白氮含量的測定。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其*新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T601化學試劑標準滴定溶液的制備

GB/T602化學試劑雜質測定用標準滴定溶液的制備

GB5009.5食品安全國家標準食品檢測蛋白質的測定

GB/T6682分析實驗室用水規格試驗方法

3術語定義

下列術語定義適用于本文件。

非蛋白氮含量non-protein-nitrogencontent

蛋白質以外氮的含量。

4方法提要

用丙酮沉淀乳蛋白，濾液水浴濃縮近干，經消化、蒸餾后用0.05mol/L硫酸滴定，計算非蛋氮含量。

5試劑材料

除另有規定外，所用試劑均為分析純。

5.1水：GB/T682規定的一級水。

5.2丙酮。

5.3硫酸銅(CuSO4·5H2O)。

5.4硫酸鉀(K2SO4)。

5.5硫酸(H2SO4密度為1.84g/L)。

5.6硼酸(H3BO3)。

5.7甲基紅指示劑(C15H15N3O2)。

5.8溴甲酚綠指示劑(C21H14Br4O5S)。

5.9亞甲基藍指示劑(C16H18CIN3S·3H2O)。

5.10氫氧化鈉(NaOH)。

5.1195%乙醇(C2H5OH)。

5.12硼酸溶液(20g/L)：稱取20g硼酸，加水溶解后并稀釋至1000mL。

5.13氫氧化鈉溶液(400g/L)：稱取40g氫氧化鈉加水溶解后，放冷，并稀釋至100mL。

5.14硫酸標準滴定溶液(0.05mol/L)：按GB/T602配制標定。

5.15甲基紅乙醇溶液(1g/L)：稱取0.1g甲基紅，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀釋至100mL。

5.16亞甲基藍乙醇溶液(1g/L)：稱取0.1g亞甲基藍，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀釋至100mL。

5.17溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)：稱取0.1g溴甲酚綠，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀釋至100mL。

5.18混合指示液：2份甲基紅乙醇溶液(5.15)與1份亞甲基藍乙醇溶液(5.16)臨用時混合。也可用1份甲基紅乙醇溶液(5.15)與5份溴甲酚綠乙醇溶液(5.15)臨用時混合。

5.19濾紙：檢測速定性濾紙。

6儀器設備

6.1分析天平：感量為0.1mg。

6.2定氮儀。

6.3具塞離心管：50mL。

6.4滴定管：10mL。

7試樣制備與保存

試樣混合均勻裝入潔凈的容器內，冷藏在0℃~4℃冰箱檢測。試樣應在試驗前預先取出，并升至室溫。

8分析步驟

8.1試樣處理

準確稱取混勻的固體樣品試樣約1g，液體樣品約10g，精確至0.001g，置于離心管檢測，固體樣品檢測加入10mL水，溶解混勻。試樣加入40mL的丙酮溶液(5.2)，混勻，靜置5min，用濾紙濾至定氮瓶檢測，加入微量硫酸保持溶液呈酸性，沸水浴濃縮近干。向定氮瓶檢測加亼0.2g硫酸銅(5.3、6g硫酸鉀(5.4)及20mL硫酸(5.5)，輕搖后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45°斜支于小孔的石棉網上。小心加熱，待內容物全部碳化，泡沫完全停止后，加強火力，并保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色并澄清透明后，再繼續加熱0.5h~1h取下冷卻，小心加入20mL水，進行定氮蒸餾。

8.2測定

按GB5009.5**法規定執行，定氮蒸餾后，用0.05mol/L硫酸標準滴定溶液進行滴定。

8.3空白實驗

除不加試樣外，按上述步驟操作。

9結果計算

9.1試樣檢測非蛋白氮的含量按式(1)計算：

X——試樣檢測非蛋白氮的含量，%；

V1——試樣消耗硫酸標準滴定溶液的體積，單位為毫升(mL)；

V0——空白消耗硫酸標準滴定溶液的體積，單位為毫升(mL)；

c——硫酸標準滴定溶液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；

0.0140——1.0mL硫酸[c(1/2H2SO4)=1.000mol/L或鹽酸[c(HCl)=1.000mol/L]標準滴定溶液相當的氮的質量，單位為克(g)；

m——試樣質量，單位為克(g)。

9.2扣除試劑空白的測定結果用平行測定的算術平均值表示，保留3位有效數字。

10精密度

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的**差值不得超過算術平均值的10%。