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快速液相分析法檢測(cè)化妝品中鄰苯二甲酸酯類化合物

作者：百檢 時(shí)間：2022-11-28 來(lái)源：互聯(lián)網(wǎng)

檢測(cè)及試驗(yàn)方法

　　試劑

　　10種鄰苯二甲酸酯類化合物包括鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二正丙酯(DPP)、鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二正戊酯(DAP)、鄰苯二甲酸二正己酯(DHP)、鄰苯二甲酸丁基芐酯(BBP)、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯(DcHP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DOP)和鄰苯二甲酸二異辛酯(DEHP)，德國(guó)Dr.Ehren—storfer公司；甲醇(色譜純)，美國(guó)Tedia公司；超純水，美國(guó)Milli—Q。

　　實(shí)驗(yàn)方法

　　校準(zhǔn)曲線的制備

　　混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(p=1 000 mg／L)：分別稱取10種鄰苯二甲酸酯類化合物標(biāo)準(zhǔn)品0.05 g(精確到O.1 mg)，用甲醇溶解，移人50 mL容量瓶中，定容，搖勻，配成質(zhì)量濃度為1 000 mg／L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

　　移取鄰苯二甲酸酯類化合物標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液0、1.OO、2.00、4.OO、6.00、8.00 mL于10 mL具塞刻度管中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。此時(shí)溶液中各組分濃度分別為O、100、200、400、600和800 mg／L。在設(shè)定色譜條件下，分別取5“L進(jìn)行HPLC分析。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度和峰面積，繪制校準(zhǔn)曲線。

　　樣品處理

　　稱取樣品約1g(精確至1mg)于10 mL具塞刻度管中，加入甲醇至刻度，振搖，超聲提取20 min，必要時(shí)高速離心。經(jīng)0.45um濾膜過(guò)濾，濾液作為待測(cè)樣液備用。

　　測(cè)定

　　按前述色譜條件操作，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。若樣品中待測(cè)組分含量過(guò)高，應(yīng)用甲醇稀釋后測(cè)定。色譜圖檢出的物質(zhì)，經(jīng)與該物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)紫外光譜圖比較確證后，根據(jù)峰面積，從校準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)組分的質(zhì)量濃度。

　　色譜條件的選擇

　　以常規(guī)液相色譜柱(TC-C18(2)，5um，4.6 mm×250 mm，安捷倫)為分析柱。以甲醇-水為流動(dòng)相，按照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局提供的《化妝品中鄰苯二甲酸酯類化合物的檢測(cè)方法》中的梯度洗脫條件，進(jìn)樣分析，結(jié)果如圖1所示。整個(gè)分析過(guò)程需要30 min(25 min的色譜分離時(shí)間加5 min的色譜柱平衡時(shí)間)，與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。采用快速分析色譜柱，整個(gè)分析過(guò)程縮短為9 min(7 min的色譜分離時(shí)間加2 min的色譜柱平衡時(shí)間)(見(jiàn)圖2)，分析時(shí)間縮短了2／3，大大提高了工作效率，同時(shí)節(jié)省了有機(jī)溶劑。

　　方法的可操作性討論

　　常規(guī)液相色譜儀是基層實(shí)驗(yàn)室普及率較高的一類分析儀器，常規(guī)的液相分析方法需要的分析時(shí)間比較長(zhǎng)(一般在30 min左右)，有機(jī)溶劑消耗量也較大。采用亞2肛m顆粒填料的超高壓液相色譜方法具有色譜柱效高、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)也大大降低了溶劑消耗量。然而采用小粒徑填料的色譜柱反壓很高，需要提供足夠的柱前壓，超出常規(guī)液相色譜儀的承受范圍(一般不超過(guò)20 MPa)，從而影響了快速分析檢測(cè)的實(shí)現(xiàn)。

　　裝填具有核殼結(jié)構(gòu)的表面多孔顆粒填料的色譜柱，具有低反壓和高柱效的特點(diǎn)，可以在常規(guī)液相色譜儀上實(shí)現(xiàn)快速分析檢測(cè)。文獻(xiàn)報(bào)道采用超高效液相色譜法分析四種鄰苯二甲酸酯，分析時(shí)間為3 min，但需要專門(mén)的超高效液相色譜儀器。使用常規(guī)液相色譜柱(圖1)，在整個(gè)分析過(guò)程中柱前壓在12～24 MPa之間變化(流動(dòng)相中有機(jī)溶劑含量的變化導(dǎo)致流動(dòng)相黏度改變，進(jìn)而導(dǎo)致柱前壓隨之變化)；而采用快速分析柱(圖2)的柱前壓在10～18 MPa之間變化(此條件下流動(dòng)相中有機(jī)含量較高，在一定程度上降低了流動(dòng)相的黏度)，常規(guī)液相色譜一般均可提供20 MPa的柱前壓，因此該方法具有較強(qiáng)的可操作性，易于在基層實(shí)驗(yàn)室普及的常規(guī)液相色譜儀上實(shí)現(xiàn)快速分析檢測(cè)。

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