作者:宋檢 時間:2022-11-30 來源:互聯網
DSM公司近期公開的專利WO2017109091A1通過改造釀酒酵母胞內的輔因子氧化途徑,提供了一種增加宿主細胞生產琥珀酸、富馬酸或蘋果酸等二羧酸的方法。
蘋果酸、富馬酸和琥珀酸等四碳二羧酸可以作為許多化學品合成前體,能用于生產除冰劑,食品添加劑,化妝品添加劑,表面活性劑或聚合物等。例如,琥珀酸轉化為1,4-丁二醇(BDO),四氫呋喃和γ-丁內酯,可以連接琥珀酸和BDO制成的聚酯聚合物。
在已有專利(WO2013/004670)釀酒酵母菌株SUC-632出發通過經典菌株改良策略獲得SUC-708,整合大腸桿菌的富馬酸酶基因(fumB)獲得SUC-813,通過替換PDC6基因過表達釀酒酵母富馬酸還原酶FRD1基因獲得SUC-947。SUC-947通過Cre酶介導的同源重組的方法先后敲除線粒體外部NADH脫氫酶、線粒體甘油-3-磷酸脫氫酶、胞質甘油-3-磷酸脫氫酶等在胞內催化輔因子(NADH、NADPH或FADH2)氧化的酶基因獲得工程菌株SUP-007。SUP-007在補料分批發酵中琥珀酸的發酵產量與SUC-947相比增加了6%。
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