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eNOS 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶Elisa試劑盒檢測

作者:荀彧 時間:2022-12-09 來源:互聯(lián)網(wǎng)

大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

規(guī)格:48T 96T

檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標 本 要 求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標記抗體
①抗原: IgG
②酶標抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4

操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍色。
⑨終止反應、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價。

相關產(chǎn)品如下:

YS01654B 人腎素(Renin)Elisa試劑盒
YS01655B 人腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒
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YS01662B 人兒茶酚胺(CA)Elisa試劑盒
YS01663B 人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)Elisa試劑盒
YS01664B 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)Elisa試劑盒
YS01665B 人5羥色胺(5-HT)Elisa試劑盒
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YS01669B 人脫氫表雄酮(DHEA)Elisa試劑盒
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YS01672B 人生長激素釋放多肽(GHRP)Elisa試劑盒
YS01673B 人抑制素B(INH-B)Elisa試劑盒
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YS01681B 人雙氫睪酮(DHT)Elisa試劑盒
YS01682B 人促生長激素釋放激素(GHRH)Elisa試劑盒
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YS01684B 人超敏游離雌三醇(uE3)Elisa試劑盒
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YS01687B 人前列腺素E1(PGE1)Elisa試劑盒
YS01688B 人內(nèi)皮素1(ET-1)Elisa試劑盒
YS01689B 人促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒
YS01690B 人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒
YS01691B 人大內(nèi)皮素(BigET)Elisa試劑盒
YS01692B 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)Elisa試劑盒
YS01693B 人降鈣素(CT)Elisa試劑盒
YS01694B 人促甲狀腺素(TSH)Elisa試劑盒
YS01695B 人皮質(zhì)醇(Cortisol)Elisa試劑盒
YS01696B 人雌二醇(E2)Elisa試劑盒
YS01697B 人脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)Elisa試劑盒
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YS01699B 人游離睪酮(F-TESTO)Elisa試劑盒
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YS01702B 人17羥孕酮(17-OHP)Elisa試劑盒
YS01703B 人三碘甲狀腺原氨酸(T3)Elisa試劑盒
YS01704B 人甲狀腺素(T4)Elisa試劑盒
YS01705B 人游離甲狀腺素(FT4)Elisa試劑盒
YS01706B 人游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)Elisa試劑盒
YS01707B 人新生甲狀腺素(NN-T4)Elisa試劑盒
YS01708B 人胰島素(INS)Elisa試劑盒
YS01709B 人C肽(C-Peptide)Elisa試劑盒
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YS01711B 人絨毛膜促性腺激素β(β-CG)Elisa試劑盒
YS01712B 人促黃體激素(LH)Elisa試劑盒
YS01713B 人潑尼松龍(PS)Elisa試劑盒
YS01714B 人瘦素(LEP)Elisa試劑盒
YS01715B 人苗條素受體(LR/Ob-R)Elisa試劑盒
YS01716B 人生長激素(HGH)Elisa試劑盒
YS01717B 人紅細胞生成素(EPO)Elisa試劑盒
YS01718B 人紅細胞生成素受體(EPOR)Elisa試劑盒

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